Glicosilación e Inmunogenicidad de un Anticuerpo Completo Producido en Plantas de Tabaco

LAREU, FABRICIO; CIRCOSTA, ARIANA; PETRUCCELLI, SILVANA

Ciudad Autonoma de Buenos Aires

Congreso; VII Feria Congreso Latinoamericano de Biotecnología- III Congreso Argentino de Biotecnología; 2006

Biolatina

Las plantas transgénicas son el sistema más económico y seguro para la producción en gran escala de proteínas recombinantes, y en particular anticuerpos monoclonales. La producción de estas últimas proteínas no sólo requiere de sistemas de alta capacidad, debido a su baja actividad específica, sino también sistemas aptos para realizar modificaciones pos-traduccionales en particular glicosilación. Esta última modificación no sólo va a determinar la habilidad de los anticuerpos producidos en plantas de reclutar las células del sistema inmune necesarias para cumplir muchas de las funciones efectoras sino también una estructura diferente podría desencadenar respuestas inmunogénicas. El objetivo de este trabajo fue producir un anticuerpo completo en plantas empleando dos señales de direccionamiento: secretoria (sec-Ab) y de retención en el retículo endoplásmico (ER-Ab); y estudiar cómo incidían los cambios estructurales sufridos al ser transportados por estas dos vías en la estructura del anticuerpo e inmunogenicidad en ratones. Los estudios de glicosilación mostraron que sec-Ab poseía glicanos complejos conteniendo β1,2-xilosa, α1,3-fucosa y epitopes Lewis a. En cambio, ER-Ab carecía de glicanos complejos siendo las formas predominantes Man 7 y Man 8, consistentes con una retención en el retículo endoplásmico o recuperación a partir del cis-Golgi. Ambos anticuerpos interactuaron de igual manera con el hapteno lo que muestra que las secuencias de direccionamiento empleadas no afectan el sitio de reconocimiento por el antígeno. En cambio ER-Ab mostró una interacción más fuerte con proteína A y resultó ser más inmunogénico que sec-Ab. Estos últimos resultados sugerirían una limitada utilidad de los anticuerpos retenidos en retículo endoplásmico. complejos siendo las formas predominantes Man 7 y Man 8, consistentes con una retención en el retículo endoplásmico o recuperación a partir del cis-Golgi. Ambos anticuerpos interactuaron de igual manera con el hapteno lo que muestra que las secuencias de direccionamiento empleadas no afectan el sitio de reconocimiento por el antígeno. En cambio ER-Ab mostró una interacción más fuerte con proteína A y resultó ser más inmunogénico que sec-Ab. Estos últimos resultados sugerirían una limitada utilidad de los anticuerpos retenidos en retículo endoplásmico. β1,2-xilosa, α1,3-fucosa y epitopes Lewis a. En cambio, ER-Ab carecía de glicanos complejos siendo las formas predominantes Man 7 y Man 8, consistentes con una retención en el retículo endoplásmico o recuperación a partir del cis-Golgi. Ambos anticuerpos interactuaron de igual manera con el hapteno lo que muestra que las secuencias de direccionamiento empleadas no afectan el sitio de reconocimiento por el antígeno. En cambio ER-Ab mostró una interacción más fuerte con proteína A y resultó ser más inmunogénico que sec-Ab. Estos últimos resultados sugerirían una limitada utilidad de los anticuerpos retenidos en retículo endoplásmico.