Análisis inmunoquimico y computacional de la reactividad cruzada entre caseínas de leche bovina y proteínas de soja

CURCIARELLO, RENATA; GONZALEZ, VIRGINIA; PARISI, GUSTAVO; PETRUCCELLI, SILVANA; DOCENA, GUILLERMO

Mar del Plata

Congreso; Reunión Científica de la Sociedad Argentina de Investigaciones Clínicas, Sociedad Argentina de Inmunologia (SAI) y Sociedad Argentina de Fisiologia; 2007

Sociedad Argentina de Inmunología, Sociedad Argentina de Investigación Clínica y sociedad Argentina de fisiología

ANALISIS INMUNOQUIMICO Y COMPUTACIONAL DE LA REACTIVIDAD CRUZADA ENTRE CASEINAS DE LECHE BOVINA Y PROTEINAS DE SOJA.  Renata Curciarello1,2, Virginia González3, Gustavo Parisi3, Silvana Petruccelli2, Guillermo Docena1 1.LISIN, Facultad de Cs.Exactas, UNLP;2.CIDCA-CONICET, Facultad de Cs.Exactas, UNLP; 3................... UNQ. Estudios previos del grupo caracterizaron la reactividad cruzada entre caseínas bovinas, principal alergeno alimentario en nuestro país, y proteínas de soja, frecuentemente empleadas en el tratamiento de la alergia a leche bovina (LV). Se obtuvieron en forma recombinante los distintos componentes de soja reactivos y un péptido que contiene la región C-terminal de las globulinas 7S, llamado a-CTD. Se planteó identificar las secuencias involucradas en la reactividad cruzada y predecir los epitopes responsables, a partir de la información de secuencias disponibles en bases de datos. Por ELISA de inhibición, empleando un suero policlonal específico de LV y distintos inhibidores de soja, incluyendo a-CTD, se logró desplazar la unión de los anticuerpos específicos de LV, lo cual confirma la reactividad cruzada observada previamente por otros métodos. Además, a-CTD, que incluiría los epitopes responsables de la reactividad cruzada, mostró reactividad por inmunoblotting frente a anticuerpos monoclonales específicos de caseínas bovinas, y por ELISA indirecto frente al suero policlonal y distintos sueros de individuos alérgicos a LV. En el 92,3% de los sueros se reveló la presencia de IgE frente a a-CTD. Sobre la base de estos resultados, se emplearon diversos métodos computacionales de predicción de epitopes para obtener péptidos de proteínas de soja y LV, con los cuales se realizaron análisis in silico para identificar las regiones implicadas en la reactividad cruzada. Por lo tanto, las proteínas recombinantes, al igual que sus contrapartidas naturales, mostraron la reactividad cruzada inmunoquímica y se identificaron regiones con similitud secuencial entre las diferentes subunidades de b-conglicinina y las caseínas bovinas. Se propuso un modelo estructural para a-CTD conteniendo las posibles regiones implicadas en la reactividad cruzada observada in vitro