INVESTIGADORES
PETRUCCELLI Silvana
congresos y reuniones científicas
Título:
El transporte de anticuerpos completos en plantas de tabaco es órgano-dependiente
Autor/es:
LAREU, F.; CIRCOSTA, A.; SILVANA PETRUCCELLI
Lugar:
Chascomus
Reunión:
Congreso; XXVI Reunión de la Sociedad Argentina de Fisiología Vegetal; 2006
Institución organizadora:
Sociedad Argentina de Fisiologia Vegetal
Resumen:
 En la actualidad miles de proteínas recombinantes son producidas en diferentes sistemas de expresión basados en plantas ya que las mismas ofrecen  grandes ventajas en términos de practicidad, economía y seguridad. Particularmente, la expresión en semillas de plantas transgénicas, tiene otras ventajas si se tienen en cuenta los costos de purificación. Sin embargo hasta el momento la expresión de anticuerpos completos en plantas  ha sido estudiada únicamente en hojas. El objetivo de este trabajo fue estudiar el direccionamiento en hojas y semillas de un anticuerpo monoclonal fusionado a dos señales de direccionamiento. Para ello, se obtuvieron plantas transgénicas de tabaco que expresan el anticuerpo catalítico Ab-14D9 con diferentes señales: de secreción (sec-Ab) y otra de  retención en retículo endoplásmico (RE) (Ab-KDEL). Se seleccionaron las plantas que producían este Ab en mayor proporción  y se estudió la vía de transporte y su localización celular a través de medidas de patrones de glicosilación (inmunoblots y MALDI-TOF) y localización subcelular por inmunomicroscopía electrónica. Sec-Ab sufre secreción en hojas como se desprende de la presencia de alfa 1,3 fucosa, beta 1,2 xilosa y epitopes de Lewis a, estos últimos típicos de proteínas extracelulares. En cambio sec-Ab en semillas es transportado a vacuolas de reserva (PSV) por una vía dependiente del aparato de Golgi. Los estudios efectuados con Ab-KDEL mostraron que es eficientemente retenido en el RE como se deduce de la presencia de  glicanos ricos en manosa (Man 7 y Man 8) y de su localización subcelular dentro del RE. En cambio, Ab-KDEL en semillas se localiza en PSV siendo transportado a este órgano por una vía Golgi dependiente. Estos resultados sugieren por un lado  que la secreción no sería el camino default en semillas  y que  la eficiencia de retención en el RE también es órgano dependiente. Estas diferencias no sólo repercuten en los niveles de acumulación y grado de glicosilación del Ab sino también la estabilidad.