Optimización de un protocolo de regeneración in vitro de girasol (Helianthus annuus) DK3915”.

CIRCOSTA, A.; CANDREVA, A.; SOSA, L.; LAREU, F.; SILVANA PETRUCCELLI

Buenos Aires

Congreso; Biolatina 2006; 2006

Foro Argentino de Biotecnologia

El girasol (Helianthus annuus) es uno  de los cultivos oleaginosos  más importantes para nuestro país por lo que desarrollo de métodos para su transformación génica será de utilidad tanto para la introducción de genes de importancia agronómica o como de calidad. El girasol es una de las especies más recalcitrantes tanto para cultivo in vitro como para transformación génica, siendo estas características  altamente dependientes del genotipo empleado. El objetivo de este trabajo fue establecer un protocolo de regeneración in vitro y agroinfiltración de girasol genotipo DK 3915. Se ensayó la capacidad de regeneración de: sección basal de cotiledones, hipocotilos y meristemas apicales empleando distintos medios de cultivo. La regeneración de una planta completa se logró con este último explanto empleando  un medio para el desarrollo de brotes y otro para enraizamiento. A fin de optimizar el protocolo, se utilizaron ápices enteros y partidos obtenidos a partir de plántulas con distintos tiempos de germinación: 3, 7 y 10 días.  Los mejores resultados se obtuvieron con ápices enteros de 3 y 7 días, que regeneran con morfología normal lográndose floración en 60-70 días. En el caso de los explantos partidos, se obtienen 2-4 tallos por explanto, que aparecen más tardíamente que en la condición anterior. Las condiciones de agroinfección ensayadas incluyeron uso de detergentes Silwett L-77 y vacío 90 mmHg obteniéndose la mayor infección en esta última condición siendo de aproximadamente 5% de los explantos. La regeneración de plantas transgénicas a partir de estos explantos está en proceso de evaluación.