Lactobacillus delbrueckii subsp. lactis CIDCA 133 modula la respuesta de c¨¦lulas eucari¨®ticas infectadas por Bacillus cereus.

ROLNY, I; TISCORNIA, I; RACEDO, S; PÉREZ, P. F. Y BOLLATI-FOGOL¨ªN, M.

Congreso; XXIII Congreso Latinoamericano de Microbiolog¨ªa. XIV Congreso Argentino de Microbiolog¨ªa.; 2016

Los probi¨®ticos modulanla acci¨®n virulenta de ciertos pat¨®genos, este efecto depende de la cepa e involucrainteracciones con c¨¦lulas del hu¨¦sped. Se estudi¨® el efecto de una cepa de Lactobacillus potencialmente probi¨®ticaen un modelo de infecci¨®n in vitro deBacillus cereus.Usando cultivos dec¨¦lulas epiteliales HT-29 y co-cultivos con c¨¦lulas dendr¨ªticas (CD) obtenidaspor diferenciaci¨®n de monocitos de sangre perif¨¦rica humana, se analiz¨® larespuesta a la infecci¨®n por B cereusy el efecto de la presencia de Ldelbrueckii subsp lactis CIDCA133. Se utilizaron las cepas B10502, T1, M2 y 2 de B cereus. Las infecciones en los sistemas de insertos se realizarona multiplicidades de infecci¨®n de 20 bacterias/c¨¦lula (HT-29, compartimentosuperior). En el compartimento inferior se colocaron CD. Luego de 18 h deincubaci¨®n se evalu¨® la producci¨®n de citoquinas, marcadores de diferenciaci¨®ny activaci¨®n en c¨¦lulas HT-29-NF-¦ÊB-hrGFP y CD por citometr¨ªa de flujo. Lal¨ªnea transfectada HT-29-NF-kB-hrGFP se us¨® para el an¨¢lisis de activaci¨®n dela v¨ªa NF-¦ÊB. La activaci¨®n dela v¨ªa NF-kB producida por B. cereus nosuper¨® el 4% de c¨¦lulas positivas (GFP+), esto se vio incrementado en presenciade la cepa 133 hasta el 10% siendo el valor del control positivo (TNF-¦Á) del 33.4%. Sin embargo la inducci¨®n deIL-8 disminuye para B cereus enpresencia de la cepa 133. El valor m¨¢s alto se obtuvo al incubar con B10502 (2009,7¡À131,8 pg/mL) similar al control positivo (TNF- ¦Á), y disminuy¨® a 562,2¡À 27,7 pg/mL en presencia de lacepa133. En los co-cultivosse observ¨® que la cepa 133 disminuy¨® la asociaci¨®n de las CD a B. cereus B10502 siendo 42,7¡À 2,0 % enausencia de 133 y 18,0¡À 0,6 % en presencia. Sin embargo, no se vieron cambiosen la expresi¨®n de CD86 (intensidad media de fluorescencia, MFI) que aument¨® entodas las condiciones (B10502, MFI: 108,9¡À 24,8; 133, MFI: 114,6¡À 23,3; B cereus m¨¢s 133, MFI: 131,2¡À 6,7). B10502condujo a un aumento en la producci¨®n de citoquinas proinflamatorias por partede las CD. Las mezclas de B cereus yla cepa 133 y las cepas separadas dieron un aumento significativo (P<0,05)de la producci¨®n de IL-8, aunque menores a los del control positivo (LPS). La producci¨®n de IL-6 mostr¨®valores similares al basal para la estimulaci¨®n con LPS (128.3¡À 11.6 pg/mL) ocon 133 (87.6¡À 123.9 pg/mL) mientras que se vio un aumento significativo al incubar conla cepa B10502 (890.6¡À 263 pg/mL) y este valor no se modific¨® en presencia de  133 (1091,5¡À 55,7 pg/mL) Tanto el est¨ªmulo con LPS como conlos microorganismos por separado, aumentaron la producci¨®n de TNF-¦Á. La incubaci¨®n con los microorganismos juntos condujo a un aumento mayor (5990,5¡À 421,3 pg/mL, P<0,05) respectoa los tratamientos individuales.  Losresultados demostraron que la presencia de Lactobacillus delbrueckii subsp. lactisCIDCA 133 modula la respuesta de las c¨¦lulas infectadas por B. cereus, y mejora la respuestaprotectora mediante incremento de la producci¨®n de TNF-¦Á en CD.