INVESTIGADORES
PEREZ Pablo Fernando
congresos y reuniones científicas
Título:
Estudio del desarrollo de Clostridium difficile en biofilm mixto con Bifidobacterium bifidum CIDCA 5310.
Autor/es:
TREJO, F. M.; HUGO, A. A.; MINNAARD, J. Y PÉREZ, P. F.
Reunión:
Congreso; XXIII Congreso Latinoamericano de Microbiología. XIV Congreso Argentino de Microbiología.; 2016
Resumen:
Estudio del desarrollo de Clostridium difficile en biofilm mixto con Bifidobacterium bifidum CIDCA 5310 Trejo, FM(1); Hugo, AA (1), Minnaard, J (1); Pérez, PF(1,2). (1) CIDCA-UNLP-CONICET CCT La Plata, (2) Cátedra de Microbiología, FCE UNLP, Buenos Aires, ArgentinaClostridium difficile (CD) es un bacilo Gram + formador de esporos, patógeno gastrointestinal, responsable de entre el 15% y el 25% de los casos de diarrea asociada a antibióticos y del 90% de los casos de colitis pseudomembranosa. Sus principales factores de virulencia son sus toxinas, A y B con actividad citopática y citotóxica respectivamente. En los últimos años, se han reportado a nivel mundial cambios en la patogénesis de CD que involucran cambios también en las poblaciones de riesgo, aumento en la incidencia y severidad de las infecciones y posible relevancia de la formación de biofilm como nuevo factor de virulencia a tener en cuenta.Objetivo: evaluar el efecto de Bifidobacterium bifidum, cepa CIDCA5310 (BB) sobre desarrollo en biofilm, actividad biológica, viabilidad y esporulación de CD cepa 117.Materiales y Métodos: cultivos puros de CD y cultivos mixtos de ambas especies (CM) se sembraron en 1 ml BHI-cisteína 0,05% p/v sobre placas de policarbonato de 24 pocillos. Como control se emplearon fosas con BHI sin sembrar. Cada cepa se sembró a DO600 = 0,05 y posteriormente se incubaron en anaerobiosis a 37ºC durante diferentes tiempos. El desarrollo de biofilm se evaluó mediante coloración con cristal violeta y se expresó como Mbiof = Abs570nmMuestra - Abs570nmControl. La actividad biológica se determinó sobre células Vero en cultivo y posterior observación microscópica. Definimos unidades arbitrarias (UA) como la inversa de la dilución que produce el 100 % del redondeo celular. La viabilidad y esporulación se cuantificaron mediante recuento en placa. La estructura del biofilm fue evaluada a través de microscopia electrónica de barrido. Resultados: CD y CM desarrollan biofilm a niveles máximos con diferencias significativas al día 4 (Mbiof CD = 0,29 ± 0,04 y Mbiof CM = 0,9 ± 0,1 p