Bioencapsulación en Artemia spp. y propiedades probióticas de cepas bacterianas aisladas de ambientes acuáticos patagónicos para su uso en acuicultura

CUBITTO M A.; FERNÁNDEZ, M.; SEQUEIROS, C. ; GARCES MARISA; OLIVERA, N.L.

Puerto Madryn

Jornada; Jornadas de Becarios 2017; 2017

Artemia sp. es uno de los microcrustáceos más utilizados como alimento vivo de larvas de peces y crustáceos en acuicultura alrededor del mundo. La bioencapsulación permite obtener larvas nauplios de Artemia con bacterias específicas en su interior. Estos microcrustáceos pueden ser usados como vectores de bacterias probióticas y también como modelo para evaluar la capacidad de las bacterias de colonizar el sistema digestivo de estos organismos acuáticos, brindando protección contra ictiopatógenos. El objetivo de este trabajo fue evaluar y comparar la capacidad de bioencapsulación de cepas bacterianas previamente aisladas de ambientes acuáticos patagónicos (TW34, T4, M26, T39 y H16) en larvas nauplios de Artemia sp. y determinar algunas propiedades para su empleo en cultivo de trucha arcoíris como probióticos. La bioencapsulación de las cepas en Artemia sp. se realizó inoculando 10, 100 y 1000 μl de cada suspensión bacteriana (DO600 =1) en tubos con nauplios de Artemia axénica e incubando 24 h a 28ºC. Los nauplios se homogeneizaron y se realizó el recuento de viables en placa (UFC/nauplio.) Además, para determinar la supervivencia de las cepas bacterianas a través del tracto digestivo de los peces, se evaluó la tolerancia a pH ácido, incubando las células 1,5 h a pH 2; 3 y 6,5 (control); así como la tolerancia a bilis, durante 1,5 h a 25ºC con 10% (v/v) de bilis de trucha arcoíris. Se determinó la hidrofobicidad (H%) de la superficie bacteriana por la adhesión a tolueno, como medida orientativa de capacidad de adhesión a epitelios. Los resultados mostraron que a mayor inóculo se obtuvo mayor número UFC/nauplio. En ningún caso se llegó a una meseta, indicando que cada nauplio podría encapsular un número aún mayor de bacterias. La cepa H16 mostró mayor capacidad de bioencapsulación (6x103 UFC/nauplio) mientras que M26 presentó el menor valor (1,3 x102 UFC/nauplio). Todas las cepas sobrevivieron a pH 3, a pesar que en algunas se observó una reducción 3 log10 en el número de viables. No se recuperaron viables a pH 2. Todas las cepas presentaron alta tolerancia a la bilis, condición esencial para la sobrevida en el intestino. En base a los H% las cepas M26, T39 y H16 se consideraron hidrofílicas (H< 20%) y TW34 y T4 moderadamente hidrofóbicas (H= 20 ‐ 50%). La tolerancia al pH 3 y a la bilis mostrada por las cepas, junto a la posibilidad de bioencapsularse en Artemia, les confieren potencial para ser evaluadas como bioprotectores en ensayos de desafíos con ictiopatógenos.