BACTERIAS LÁCTICAS COMO BIOCONTROLADORES DE LEVADURAS CONTAMINANTES AISLADAS DE ENSILADOS DE MAÍZ

CARRIZO, NATALÍ IVANA; SOBERÓN, JOSÉ RODOLFO; MENDOZA, LUCÍA MARGARITA; GEREZ CARLA LUCIANA

Santiago del Estero

Congreso; III Congreso de Ciencia y Tecnología del CODINOA; 2025

Universidad Nacional de Santiago del Estero (UNSE)

Una fermentación deficiente en los ensilados induce que ocurra un deterioro aeróbico del silo al exponerse al aire, mediante una secuencia de eventos microbiológicos. Las levaduras asimiladoras de ácido láctico (LAAL), colonizadores aeróbicos primarios, inician el deterioro y provocan la pérdida de calidad nutricional del forraje. El objetivo de este trabajo fue aislar e identificar LAAL provenientes de ensilados de maíz y estudiar el efecto inhibitorio de las bacterias lácticas (BL) sobre las mismas. Las LAAL fueron aisladas de muestras de silos bolsa de maíz forrajero, recolectados en el interior de Tucumán. Los aislamientos se realizaron en medio YPD con cloranfenicol y en PCA. Las colonias que presentaron características morfológicas levaduriformes fueron seleccionadas y conservadas. A fin de evidenciar la capacidad de asimilar lactato de los aislados, se sembraron en un medio de cultivo mínimo y diferencial con D-Lactato sintético. Los aislados capaces de crecer en este medio y que presentaron un halo de color azul se consideraron LAAL. Estas levaduras se identificaron mediante la amplificación y secuenciación del dominio D1/D2 del gen 26S del ARNr y la asignación a nivel de especie se realizó utilizando la herramienta BLAST, comparando las secuencias obtenidas con la base de datos GenBank del NCBI. El efecto inhibitorio de 4 cepas de BL (Lactiplantibacillus plantarum CRL363, CRL510, CRL778 y Pediococcus acidilactici CRL1753) con perfil metabólico y funcional para conformar inoculantes lácticos, se evaluó sobre estas LAAL mediante la técnica de microdilución. Cultivos activos de BL en medio MRS caldo, se centrifugaron hasta obtener sus sobrenadantes (SCRL), y sus neutralizados con NaOH 1N (NSCRL). Ambos sobrenadantes de BL se inocularon con cultivos activos de LAAL, se incubaron a 30°C por 24-48h, y se realizaron lecturas de absorbancia a 600 nm.Trece cepas de levaduras se aislaron de silos, de las cuales sólo 6 demostraron ser LAAL. Las mismas se identificaron como Pichia kudriavzevii (cepas L3, L11, L13 y L15), Kluyveromyces marxianus (L12) y Meyerozyma guilliermondii (L16). Los SCRL inhibieron a todas las LAAL con elevados porcentajes (92-95%), excepto CRL510 que sólo tuvo efecto sobre Kluyveromyces marxianus L12 y Meyerozyma guilliermondii L16. Los NSCRL mostraron menor efecto respecto a los SCRL sobre las LAAL evidenciándose la naturaleza acídica de los metabolitos inhibitorios. Sólo se mantuvo el efecto inhibitorio de NSCRL363 sobre Pichia Kudriavzevii L13 y L15 y Kluyveromyces marxianus L12. En conclusión, se aislaron 6 cepas de LAAL de especies típicas contaminantes de silos y se evidenció un fuerte efecto inhibitorio de las cepas L. plantarum CRL778, Pediococcus acidilactici CRL1753 y L. plantarum CRL363, lo que las perfila como agentes de biocontrol y prometedoras candidatas para la formulación de inoculantes lácticos que permitan contrarrestar el deterioro aeróbico de los ensilados de maíz mejorando así su conservación.