PERSONAL DE APOYO
NEME TAUIL Ricardo Martin
convenios, asesorías y/o servicios tecnológicos
Título:
FIL-Estudios de biosimilaridad de proteína recombinante
Autor/es:
MORENO DE COLONNA, SILVIA; VALACCO, MARÍA PÍA; NEME TAUIL, RICARDO MARTÍN; FERNÁNDEZ, JORGE GERMÁN
Fecha inicio:
2017-03-01
Fecha finalización:
2017-05-01
Campo de Aplicación:
Tecnologia sanitaria y curativa-Varios
Descripción:
La empresa interesada en el servicio nos provee con aproximadamente un miligramo de 7 lotes del producto biosimilar que se desea validar, y del producto innovador.Se realizan estudios de caracterización de la proteína en cuanto a su secuencia aminoacídica, Para el mapeo peptídico, que pretende cubrir la mayor parte de la secuencia por MS y MSMS, se comenzó realizando digestiones virtuales para determinar enzima óptima para obtener la mayor cobertura posible, usando enzimas que permitan detectar zonas complementarias de la secuencia, y para asegurarnos de cubrir extremos N y C terminales. A partir de este análisis se decidió realizar digestiones enzimáticas de la molécula con varias proteasas de sitio de corte específico (Quimotripsina, corta a la derecha de triptofano, metionina, fenilalanina, tirosina, leucina; Gluc-c, corta a la derecha de glutámico y aspártico) seguido de un análisis de los fragmentos proteolíticos por nanoHPLC, acoplada a Q Exactive (ESI-Orbitrap) para lograr la mayor cobertura de la secuencia con los péptidos identificados.Se logró una cobertura de un 68%. Se realizaron los informes correspondientes.Se ha podido avanzar con un 100% del proyecto, que incluye mapeo peptídico por MS y MSMS de la proteína.