INVESTIGADORES
VALACCO Maria Pia
congresos y reuniones científicas
Título:
PERFIL PROTEÓMICO DE LOS INTERACTORES DE HO-1 EN CÁNCER DE PRÓSTATA
Autor/es:
GERALDINE GUERON, PÍA VALACCO, BELÉN ELGUERO, FEDERICO COLUCCIO-LESKOW, ALEJANDRA PAEZ, ADRIANA DE SIERVI, ELBA VAZQUEZ
Lugar:
Mar del Plata
Reunión:
Congreso; LVII Reunion Anual SAIC; 2012
Institución organizadora:
Sociedad Argentina de Investigacion Clinica
Resumen:
La etiología del cáncer de próstata (PCa) no es clara, dificultando la prevención temparana. El antígeno prostático específico (PSA) se utiliza como el marcador de detección, sin embargo tiene baja especificidad. Surge la necesidad de encontrar otros marcadores tumorales prostáticos más específicos. La hemo-oxigenasa 1 (HO-1) ejerce funciones anti-oxidantes y anti-inflamatorias. Previamente documentamos su expresión nuclear en carcinomas prostáticos humanos. En líneas celulares de PCa la sobre-expresión de HO-1 induje su localización nuclear e inhibió la proliferación, migración e invasión y el crecimiento tumoral in vivo. Análisis de ChIP demostraron que HO-1 se asocia a promotores de genes relevantes en PCa como PSA. Nuestra hipótesis se basa en que HO-1 en el núcleo podría actuar como un co-regulador de la transcripción favoreciendo un fenotipo menos agresivo. Por tal motivo es importante encontrar los interactores moleculares de HO-1. Para abordar este objetivo empleamos técnicas de proteómica utilizando la proteína recombinante HO-GST expresándola en células PC3. Se purificaron los complejos que co-eluyeron con HO-1 y se corrieron en un gel de poliacrilamida. Las bandas proteicas fueron digeridas con tripsina. Los péptidos se analizaron por MALDI-TOF/TOF (Ultraflex II). Con los espectros obtenidos se generaron lista de picos (Software Flex Analysis) y se realizaron búsquedas con el Mascot, (tolerancia de 200 ppm), utilizando carbamidometilación, acetilacón del extremo N-terminal y oxidación, como modificaciones fijas. Se compararon los hits significativos obtenidos para las células identificándose a la proteína muskelina, como candidata a ser interactora de HO-1. Se realizarán estudios de pull-down, para verificar esta interacción y construir el interactoma de HO-1, permitiendo detectar la expresión de proteínas no reportadas aún en células tumorales prostáticas y que pueden surgir como blancos terapéuticos nóveles o factores pronóstico para el PCa.