SCREENING DE BIBLIOTECAS COMBINATORIAS PEPTÍDICAS PARA LA BÚSQUEDA DE LIGANDOS DE ALTA AFINIDAD POR LA ERITROPOYETINA

M. C. MARTÍNEZ-CERON; M. M. MARANI; M. ETCHEVERRIGARAY; F.ALBERICIO; O. CASCONE; S. A. CAMPERI

Buenos Aires, Argentina

Congreso; ETIF 2008-Congreso y exposición de tecnología farmacéutica; 2008

ETIF S.A.

Las bibliotecas combinatorias peptídicas del tipo “una bolilla un péptido” consisten en millones de péptidos sintetizados en fase sólida donde cada bolilla de resina tiene una sola entidad péptidica. Se aplican en el diseño de ligandos con aplicaciones analíticas, farmacológicas y en la purificación de proteínas. El objetivo de este trabajo fue hallar ligandos de alta afinidad por la eritropoyetina recombinante humana (rhEPO). La rhEPO tiene aplicaciones terapéuticas en la anemia asociada con la insuficiencia renal crónica y la anemia inducida por AZT en SIDA. Se sintetizó una biblioteca combinatoria de octapéptidos utilizando la química Fmoc. Para el screening se puso en contacto la biblioteca con la rhEPO conjugada con el colorante fluorescente Texas-Red (TR). Numerosas bolillas presentaron fluorescencia. Se separaron las bolillas falsas positivas (adsorben al conjugado a través de la unión péptido-TR) de las positivas (adsorben al conjugado a través de la unión péptido-rhEPO). Estas últimas presentaron un halo característico. Los péptidos de las bolillas seleccionadas se secuenciaron por MALDI-TOF MS. Se hallaron 20 péptidos con afinidad por la rhEPO. Próximamente se evaluará la afinidad relativa de los mismos tanto para su aplicación analítica como también en la purificación de la rhEPO.