PURIFICACIÓN DE HORMONA DE CRECIMIENTO HUMANA RECOMBINANTE A PARTIR DE LECHE BOVINA USANDO PÉPTIDOS CORTOS

S. L. SAAVEDRA; M. C. MARTÍNEZ-CERON; S. L. GIUDICESSI; G. FORNO; F. ALBERICIO; O. CASCONE; S. A. CAMPERI

Buenos Aires

Simposio; SIMPOSIO ARGENTINO DE BIOPROCESOS. SAPROBIO 2016; 2016

SAPROBIO

La hormona de crecimiento recombinante humana (rhGH) se utiliza en el tratamiento de diversas patologías relacionadas al crecimiento. Con el objetivo de purificarla a partir de leche de vaca transgénica se propuso utilizar cromatografía de afinidad con ligandos peptídicos inmovilizados. Se diseñó una biblioteca combinatoria peptídica en fase sólida de la que se aislaron, por medio de screenings, péptidos con posible afinidad por la misma. Se secuenciaron por espectrometría de masas, se eligieron tres para inmovilizar en agarosa, y se evaluó su afinidad por la rhGH. El péptido que mostró la mejor performance presentó una Kd de 3.1 × 10-6 M. Se sembró en la columna cromatográfica con el péptido inmovilizado una mezcla de leche descremada/rhGH. El 100% de la hormona se adsorbió a la matriz de afinidad, pero la rhGH coeluyó con proteínas contaminantes. Estos lograron eliminarse con una precipitación selectiva de algunas proteínas contaminantes previa a la cromatografía.