UV-MALDI-MS y ESI-MS como herramientas para la caracterización de los productos de fotosensibilización de desoxirribonucleótidos por norharmano

M. MICAELA GONZÁLEZ; FEDERICO A. O. RASSE-SURIANI; MARIANA VIGNONI; M. PAULA DENOFRIO; J. GABRIEL YAÑUK; FRANCO M. CABRERIZO; ROSA ERRA-BALSELLS

Los Cocos

Congreso; I Congreso Argentino de Espectrometría de Masa; 2012

Las técnicas deespectrometría de masa UV-MALDI-MS (UV-Matrix-assisted laserdesorption/ionization mass spectrometry) y ESI-MS (Electrosprayionization mass spectrometry) comprenden métodos de ionización suaves, conescasa o ninguna fragmentación, y brindan información generalmente sobre el ionmolecular. Presentan, además, una elevada sensibilidad (del orden de femtomol oátomomol). Dichas características las hacen adecuadas para el análisis dematerial genético (ADN 1,2, oligonucleótidos 3,4,5, etc),constituyendo esto una aplicación interesante en el campo del diagnóstico deenfermedades. En el presente trabajo se las ha empleado para la caracterizaciónde los productos de la oxidación fotoinducida de desoxirribonucleótidos por norharmano (nHo).El nHo (Esquema 1) pertenece a una familia dealcaloides, las β-carbolinas (βCs), presentes en unagran variedad de sistemas vivos 6,7,8. En un estudio reciente, hemos demostrado que bajoirradiación UV-A, ciertas βCs son capaces de inducir daño fotoinducido al ADN 9,10.Para obtener información sobre la reactividad de las βCs, ensus estados electrónicos excitados, con los monómeros que conforman la moléculade ADN (i.e.,desoxirribonucleótidos), realizamos un estudio de fotosensibilización de2?-desoxiadenosina-5?-monofosfato (dAMP) y 2?-desoxiguanosina-5?-monofosfato(dGMP), utilizando al nHo como fotosensibilizador, ensolución acuosa y bajo irradiación UV-A (350 nm). Los fotoproductosobtenidos fueron caracterizados por las espectrometrías de masa UV-MALDI y ESI,utilizando en ambos casos un analizador de tiempo de vuelo (TOF). A pesar delas pequeñas cantidades de productos formados, gracias a la alta sensibilidadde dichas técnicas, pudo detectarse la presencia de 8-oxo-dAMP y 8-oxo-dGMP,ambos marcadores de daño oxidativo del material genético (Esquema 1), sin necesidadde la separación de los productos ni la utilización de patrones.