INVESTIGADORES
BUZZOLA Fernanda Roxana
congresos y reuniones científicas
Título:
Efecto de concentraciones subinhibitorias de ciprofloxacina sobre la expresión de estafiloxantina en Staphylococcus aureus
Autor/es:
RIVIERE AN; DOTTO, CM; LOMBARTE SERRAT, A; SULIGOY M; SORDELLI DO; GIACOMODONATO MN; BUZZOLA FR
Reunión:
Congreso; 16 Congreso Internacional de Medicina Interna del Hospital de Clínicas de Buenos Aires; 2016
Resumen:
Objetivos: Staphylococcus aureus puede causar infecciones severas, agudas o crónicas, tanto en pacientes hospitalizados como en individuos de la comunidad. Sus colonias suelen ser amarillas-anaranjadas debido a pigmentos carotenoides entre los que se destaca la estafiloxantina. La estafiloxantina actúa como un antioxidante y puede alterar la rigidez de la membrana contribuyendo al ?fitness? de S. aureus durante el proceso infeccioso. S. aureus posee la habilidad de detectar los cambios del microambiente y responde de manera rápida y proporcional a las señales del entorno modificando la virulencia. En bajas concentraciones, ciertos antibióticos actuarían como inductores de los factores de virulencia de S. aureus. El objetivo del trabajo fue investigar el efecto de concentraciones subinhibitorias de ciprofloxacina sobre la producción de estafiloxantina, de especies reactivas del oxígeno (ROS) endógenas y actividad hemolítica en aislamientos de S. aureus meticilina resistentes (SAMR) y sensibles (SAMS).Materiales y Métodos: Se seleccionaron 10 aislamientos S. aureus de nuestra colección con genotipo y perfil de sensibilidad antibiótica previamente caracterizados. Se utilizó 0.17 µg/ml de ciprofloxacina como concentración subinhibitoria. El pigmento extraído con metanol se cuantificó espectrofotométricamente a 450 nm y se correlacionó a la densidad óptica del cultivo a 600 nm. Se registraron los ROS endógenos de las biopelículas crecidas en presencia o ausencia del antibiótico por reducción de nitroazul tetrazolio. La actividad hemolítica se determinó midiendo la absorbancia a 540 nm de los eritrocitos lisados luego de la incubación con el sobrenadante de las biopelículas tratadas o no. Resultados: Los aislamientos SAMR produjeron mayores niveles de estafiloxantina (mediana Abs450: 0.425) respecto de aquellos aislamientos SAMS (mediana Abs450: 0.265; p=0.04; t-test). La exposición a bajas concentraciones de ciprofloxacina incrementó significativamente la expresión del pigmento en la mayoría de los aislamientos (p=0.04; t-test), lo que se correlacionó con el aumento de generación de ROS endógenos en presencia del antibiótico (p=0.03; t-test). A diferencia de lo observado en las cepas SAMS, las biopelículas de los aislamientos SAMR tratados con bajas concentraciones de ciprofloxacina mostraron un incremento significativo de ROS endógeno (mediana Abs575 con ciprofloxacina: 1.819 vs control: 1.148; p=0.02; t-test). La actividad hemolítica de los aislamientos SAMR (Mediana Abs540: 0.077) crecidos en biopelícula fue significativamente menor que la registrada para aquellos SAMS (Mediana Abs540: 0.74; p=0.04; t-test) y la presencia de ciprofloxacina no indujo cambios.Conclusiones: Bajas concentraciones de ciprofloxacina generan un aumento de ROS endógeno suficiente para inducir en S. aureus el incremento de estafiloxantina. Niveles elevados del pigmento y disminuidos de hemolisina en los aislamientos SAMR permitiría una mejor adaptación de éste patógeno al ambiente hostil.