Glicosilación enzimática de hidroquinona

BRAUN LE; MAZZAFERRO L; BRECCIA JD

Simposio; SAPROBIO (Simposio Argentino de Bioprocesos); 2012

La síntesis a medida de carbohidratos y glicoderivados abre las puertas para el desarrollo de glicodrogas más activas o más efectivas. Las glicosidasas pueden ser usadas para la síntesis de glicósidos ya sea mediante hidrólisis reversa o transglicosilación. Este trabajo consiste en la utilización de la actividad enzimática 6-ramnosil-7-glucosidasa (EC 3.2.1.168) recientemente descripta por nuestro laboratorio para la síntesis de hidroquinona rutinosilada. La hidroquinona posee en su estructura dos grupos oxidrilos arílicos, y por su comportamiento como inhibidor de la enzima tirosinasa encuentra aplicación en productos cosméticos para blanqueamiento de la piel. Sin embargo, ésta no es químicamente estable y las cremas que la contienen sufren pardeamiento. Resultados. Se estudió la capacidad de transglicosilación de 6-ramnosil-7-glucosidasa hacia alcoholes arílicos. Se encontró que el biocatalizador es capaz de transglicosilar hidroquinona en solución acuosa cuando se utiliza como donor de rutinosa el flavonoide hesperidina en cantidades equimolares. Con el fin de optimizar la reacción de transglicosilación, y teniendoen cuenta que la hidroquinona se oxida fácilmente a p-benzoquinona en solución acuosa, su estabilidad se midió a diferentes valores de pH. Se encontró que la formación de pbenzoquinona no era significativa a pH ligeramente ácido (pH B 6), por lo que se estudió la cinética de transglicosilación a dichos valores de pH (4, 5 y 6). En todos los casos se encontró que la producción era máxima luego de 1-2 h cuando se utilizaban 0.02 U/ml de enzima, para luego disminuir, probablemente porque hidroquinona rutinosilada es sustrato de la enzima. La producción de hidroquinona rutinosilada fue máxima a pH 5 con un rendimiento del 12.5%, lo cual corresponde con el óptimo de la enzima para reacciones de hidrólisis. Conclusiones. El catalizador 6-ramnosil-7-glucosidasa es capaz de transglicosilarhidroquinona con rendimiento del 12.5% luego de 2 h a pH 5 y 30ºC. Dichos parámetrospermitirán la obtención a mayor escala de hidroquinona rutinosilada, un compuesto químicamente más estable que hidroquinona.