INVESTIGADORES
BOUZAT Cecilia Beatriz
congresos y reuniones científicas
Título:
Caracterización a nivel de canal único de receptores nicotínicos homoméricos
Autor/es:
D RAYES,; G SPITZMAUL,; CECILIA BEATRIZ BOUZAT
Lugar:
Mar del Plata
Reunión:
Congreso; Primer Congreso Conjunto de Sociedades Biomédicas; 2004
Institución organizadora:
Sociedades Biomédicas (SAN, SAIB; SAFE, SAB)
Resumen:
La familia de receptores Cys-Loop comprende a receptores nicotínicos, de serotonina (5HT3-R), de GABA (AyC) y de glicina. Dentro de los nicotínicos existen receptores heteropentámericos y el homopentámero alfa7 neuronal. Dado su rol esencial en diversos procesos del sistema nervioso, la farmacología de este último ha sido ampliamente estudiada. Sin embargo no se ha logrado hasta el momento una caracterización electrofisiológica a nivel de canal único debido a su baja expresión en sistemas heterólogos. Con la finalidad de encontrar un modelo válido para realizar este estudio, utilizamos un receptor quimérico con el dominio extracelular de alfa7 y los segmentos transmembranales de 5HT3-R y que presenta alta expresión en células. Además realizamos mutaciones sobre este receptor para aumentar la conductancia y poder así resolver los canales únicos. La activación por agonistas permite observar eventos de apertura con conductancia de 99 pS. La mínima concentración a la cual se observa activación es 10, 50 y 300 mM para nicotina, ACh y colina respectivamente. A estas concentraciones los tiempos de estado abiertos son semejantes para nicotina y ACh, siendo 3 veces más breves los eventos activados por colina. Con ninguno de los agonistas estudiados se observan eventos repetitivos de apertura y cierre a alta concentraciones, sugiriendo un proceso de desensibilización rápido. Tanto nicotina como ACh, actúan, además, como bloqueadores de canal abierto, siendo las constantes de afinidad para el bloqueo (KB) de 18.7 y 45mM respectivamente. A su vez, se observa una reducción de la conductancia con concentraciones crecientes de Ca++ y Mg++, indicando un bloqueo rápido de canal abierto por parte de los mismos (KB= 7.8 y 4mM respectivamente). Este trabajo tiene como objetivo establecer un modelo válido para el estudio a nivel de canal único de la región extracelular del receptor alfa7 con el fin de dilucidar mecanismos de acción de drogas y fármacos que modulan su actividad.