Detección de anticuerpos anti-Fosfolipasa A1 y anti-fosfolipidos en sueros de pacientes infectados con Trypanosoma cruzi.

BELAUNZARÁN, ML; LAMMEL, EM; GIMÉNEZ, G; BOTT, EMANUEL; ISOLA, ELD

Mar del Plata

Congreso; IX Congreso de Protozoología y Enfermedades Parasitarias.; 2011

Sociedad Argentina de Protozoologia

Detección de anticuerpos anti-Fosfolipasa A1 y anti-fosfolipidos en sueros de pacientes infectados con Trypanosoma cruzi.   María Laura Belaunzarán, Estela María Lammel, Guadalupe Giménez, Emanuel Bott, Elvira LD de Isola. Departamento de Microbiología, Parasitología e Inmunología. Facultad de Medicina. Universidad de Buenos Aires. Argentina   Previamente determinamos en T. cruzi la actividad Fosfolipasa A1 (PLA1) siendo en los estadios infectivos significativamente mayor que en los no infectivos, asociada a membrana y secretada. La enzima fue purificada, caracterizada y expresada de forma recombinante (Tc-PLA1r). Determinamos además que induce cambios significativos en el perfil lipídico de la célula huésped, generando ácidos grasos, diacilglicerol y lisofosfolípidos. Posteriormente detectamos en sueros de ratones infectados con T. cruzi, la presencia de anticuerpos neutralizantes de la actividad PLA1, tal como ha sido reportado en T. brucei (Hambrey PN y col, 1980). Más aún, demostramos que los anticuerpos anti-PLA1 inhiben significativamente la invasión in vitro a la célula huésped, sugiriendo la relevancia de la enzima en la invasión parasitaria (Belaunzarán ML y col. 2007). En el presente trabajo se estudió por Inmunoblot la presencia de anticuerpos de isotipo IgG anti- Tc-PLA1r en sueros de de pacientes en diferentes etapas de la Enfermedad de Chagas (N=10). El 50% de los sueros reconoció la Tc-PLA1r, independientemente de la etapa, no pudiéndose establecer correlación entre reactividad del suero y las etapas de la Enfermedad de Chagas. Dado que la PLA1 también está presente en Tripanosomas africanos y Escherichia coli, se analizó si los sueros de pacientes infectados con T. brucei (N=6) o E. coli 0157:H7 (N=4), eran capaces de reconocer Tc-PLA1r. El 66% de los sueros infectados con T. brucei reconocieron la enzima, mientras que todos los sueros de pacientes infectados con E. coli 0157:H7 reconocieron la Tc-PLA1r. Estos resultados indican la existencia de reacción cruzada para esta enzima como antígeno, no sólo entre diferentes especies de Tripanosomátidos sino también con organismos procariotas. Dado que por acción de la PLA1 se generan lípidos bioactivos, los que podrían quedar expuestos en la membrana celular y estimular al sistema inmune, evaluamos por ELISA la presencia de anticuerpos anti fosfatidiletanolamina (PE), lisoPE, fosfatidilcolina (PC) y lisoPC en los sueros de pacientes infectados con T. cruzi. Los resultados mostraron producción de anticuerpos de isotipo IgG contra los cuatro fosfolípidos, siendo mayor la respuesta para PC y LisoPC que para PE y LisoPE. Se detectó escasa o nula reactividad en todos los sueros para el isotipo IgM. En conclusión, la infección por T. cruzi induce anticuerpos anti-PLA1 y antifosfolípidos cuyo rol en la Enfermedad de Chagas es relevante explorar. Financiado por UBA.