INVESTIGADORES
CASTAGNARO atilio pedro
congresos y reuniones científicas
Título:
Detección molecular de los agentes causales de roya en caña de azúcar
Autor/es:
BERTANI, R. ; PERERA,F.; FUNES, C.; KAIRUZ,C; ARIAS,M.; GONZALES, V; PLOPER, L. D; CASTAGNARO, AP.
Reunión:
Congreso; II Congreso Argentino de Fitopatologia. Una puerta hacia la sanidad vegetal; 2011
Resumen:
La roya marrón (Puccinia melanocephala), presente en Tucumán desde 1988; y la roya naranja (P. kuehnii), aún no reportada en Argentina, ocasionan pérdidas en el rendimiento de la caña de azúcar. Dado que la observación visual a campo dificulta la diferenciación de ambas patologías, y siendo la roya naranja una amenaza potencial para la agroindustria cañera, es imprescindible disponer de técnicas de diagnóstico específicas. El objetivo del trabajo fue optimizar una metodología molecular (PCR) para el diagnóstico de ambos patógenos. Se colectaron 30 muestras de hojas jóvenes con síntomas de roya, se les realizó la extracción de ácidos nucleicos con la técnica de CTAB modificada, con y sin limpieza adicional con fenol. Para la amplificación de diferentes fragmentos del ADN ribosomal se utilizaron cinco pares de cebadores: dos generales para hongos (ITS1F/ITS4, NL1/NL4); uno para diferenciar ambos patógenos (PkPmF/PkPmR); uno específico para P. melanocephala (Pm1F/Pm1R) y otro para P. kuehnii (PkPmF/Pk1R). El producto de PCR fue purificado y secuenciado, comparando las secuencias con las disponibles en el GenBank. Las muestras resultaron positivas para P. melanocephala, amplificando fragmentos de 670 pb (ITS1F/ITS4), 608 pb (NL1/NL4), 585 pb (PkPmF/PkPmR) y 480 pb (Pm1F/Pm1R). No se observó la banda del tamaño esperado de 527 pb al utilizar el par específico para P. kuehnii. La EEAOC pone a disposición esta metodología para el diagnóstico de ambos patógenos.