INVESTIGADORES
BLANK viviana Claudia
congresos y reuniones científicas
Título:
Vías apoptóticas involucradas en la acción antitumoral de un péptido cíclico del Interferón-alfa2b
Autor/es:
V. C. BLANK; C. PEÑA; L.P.ROGUIN
Lugar:
Mar del Plata, Argentina
Reunión:
Congreso; LI Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica, LIV Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Inmunología; 2007
Resumen:
En estudios previos hemos diseñado y caracterizado un péptido quimérico cíclico (PQC) del interferón-a2b (IFN-a2b) que simula la región de la citoquina que se une a sus receptores e induce apoptosis en células WISH. Con el propósito de investigar los mecanismos moleculares responsables de la acción apoptótica del PQC, se evaluó la activación de las caspasas 3, 8 y 9. Luego de incubar las células WISH durante 72 hs con IFN-a2b o PQC se observó un incremento de un 90% y 50%, respectivamente, en la actividad de caspasa 3, y un aumento de la actividad de las caspasas 8 y 9 (caspasa 8: 1.5 ± 0.1, IFN-a2b y 1.6 ± 0.1, PQC; caspasa 9: 1.6 ± 0.3, IFN-a2b y 1.7 ± 0.3, PQC). También se determinó el porcentaje de células hipodiploides en presencia de inhibidores de caspasas 8 y 9. Después de tratar las células por 72 h con IFN-a2b se obtuvo un 28% de células apoptóticas. Este valor disminuyó alrededor de un 30% al añadir inhibidores de caspasas. Cuando las células se incubaron con PQC e inhibidores, la población de células hipodiploides se redujo entre un 20 y un 40%. Además, por ensayos de Western Blot se evaluó la expresión de los receptores Fas (FasR) y TRAIL y del ligando Fas (FasL) luego de incubar las células durante 48 hs con IFN-a2b o PQC. Los resultados obtenidos mostraron un incremento de la expresión de FasR tanto en presencia de IFN-a2b como de PQC (2,1 ± 0,9, IFN-a2b y 3,8 ± 0,9, PQC), mientras que no se observaron cambios en la expresión de TRAIL o FasL. Cuando se estudió el efecto de un anticuerpo monoclonal neutralizante de FasR sobre la acción antiproliferativa de IFN-a2b y PQC, se observó que la actividad de PQC disminuyó ~20%, mientras que no se alteró la acción del IFN-a2b. Los resultados obtenidos sugieren que la apoptosis inducida por IFN-a2b o PQC está mediada por la activación tanto del receptor Fas como de la vía mitocondrial. El efecto diferencial del bloqueo del FasR sobre la acción antiproliferativa del PQC y del IFN-a2b, sugiere una mayor relevancia de la vía del receptor Fas en la acción antitumoral del derivado peptídico.