Efecto protector de derivados de membrana amniótica humana en un modelo in vitro de estrés oxidativo sobre células de epitelio pigmentario de la retina

VALVERDE GASTÓN; BERRA ALEJANDRO; ANA VANESA TORBIDONI

Congreso; XIII CONGRESO NACIONAL DE INVESTIGACIÓN EN VISIÓN Y OFTALMOLOGÍA; 2021

Objetivos: La degeneración macular relacionada con la edad (DMAE) progresa desde etapas tempranas hasta tardías, siendo estas últimas de difícil tratamiento. La membrana amniótica humana (hAM) es fuente de agentes anti-inflamatorios y de factores de crecimiento y podría ser una alternativa para su tratamiento. Nuestros objetivos fueron analizar el efecto de derivados hAM sobre la viabilidad celular y las señales inflamatorias en un modelo in vitro de DMAE Métodos: utilizamos peróxido de hidrógeno (H2O2, 0,1-0,4 mM) para inducir daño oxidativo en células de epitelio pigmentario humano (ARPE-19). Las células se pretrataron o postrataron con diferentes derivados de hAM (50 µg) durante 3 horas. Usamos tres derivados de hAM: fresca (F-hAM), liofilizada (L-hAM) y hAM homogeneizada-liofilizada (HL-hAM). La viabilidad celular se evaluó usando el ensayo de MTT y se midieron IL-6 e IL-8, usando kits de ELISA.Resultados: El tratamiento H2O2 induce una reducción de la sobrevida celular dependiente de la concentración. Tanto el pretratamiento y como el postratamiento con hAM-L y hAM-F disminuyen este efecto. El pretratamiento con hAM-F previene el efecto de la H2O2 incluso en la máxima concentración usada, observándose niveles de sobrevida celular similares a los del control sin tratamiento con H2O2. Observamos que IL-8 e IL-6 aumentaron con el tratamiento con H2O2 y ninguno de los derivados de hAM logró una reducción de estas citoquinas.Conclusiones: Estos hallazgos demuestran que los derivados de hAM protegen a las células ARPE-19 de la reducción de la viabilidad celular inducida por H2O2, aunque el efecto anti-inflamatorio no fue detectado.