EFECTOS PRELIMINARES DE CEPAS AISLADAS DE ABEJAS SIN AGUIJÓN QUE INHIBEN PATÓGENOS DE Apis mellifera

RAMIRES, MARA T.; TEJERINA MARCOS R.; BENÍTEZ AHRENDTS, MARCELO R.

Congreso; II CONGRESO DE CIENCIA Y TECNOLOGÍA DEL CODINOA 2024; 2024

En los últimos años se busca disminuir la utilización de antimicrobianos sintéticos para el tratamiento de diferentes enfermedades que afectan a las abejas, debido a que estos son costosos, muchos generan resistencia en los patógenos y dejan residuos. Estudiar la composición y función de la microbiota asociada a las abejas nativas sin aguijón es una estrategia planteada para hacer frente a esta problemática. El objetivo de este trabajo fue seleccionar e identificar bacterias de pan de polen de Tetragonisca fiebrigi que inhiban a Ascosphaera apis y Paenibacillus larvae patógenos para Apis mellífera. Mediante enriquecimiento bacterial, se aislaron bacterias del pan de polen, por el método de sembrado por barrera se seleccionaron las cepas que inhibían a A. apis, y se determinó el tiempo (24, 48 y 72hs), temperatura (25, 30 y 37°C) y medio de cultivo óptimos para su crecimiento. Los ensayos se realizaron con 100, 200 y 300L de la solución madre, tanto con suspensiones celulares como con sus metabolitos en medio Caldo Nutritivo. Los ensayos de inhibición contra A. apis se realizaron en 20mL de medio MY20 cada uno, y el porcentaje de inhibición se determinó mediante la medición de la biomasa del hongo. El control negativo consistió en sembrar una porción de A. apis en medio MY20. Se sembró P. larvae en medio sólido Muller-Hilton, se realizaron dos orificios de 8 mm de diámetro por placa donde se sembraron 100L de cada bacteria aislada y se dejó incubar por 24hs a 37°C, luego se midió el tamaño de los halos de inhibición. Los datos se expresaron como media±desviación estándar. El análisis estadístico se realizó mediante ANOVA y la prueba de comparación entre medias de Turkey con 0.05 de probabilidad de cometer error tipo I. Se aislaron tres cepas bacterianas: Pantoea agglomerans (GenBank: OR500280), Enterobacter sp. (GenBank: OR500279) y Staphylococcus epidermidis (GenBank: PP194265). P. agglomerans (OR500280) con concentración de 1,3x108 UFC/mL y Enterobacter sp. (OR500279) con 7x108 UFC/mL inhibieron el crecimiento de cepas de A. apis, en un 100% respecto al control, mientras que 1,2x108 UFC/mL de S. epidermidis (PP194265) inhibió el crecimiento micelar de ambas cepas en porcentajes cercanos al 70% con respecto al control, sin formación de esporocistos. Por otra parte, 1,5x109 UFC/mL de P. agglomerans (OR500280) formó halos de inhibición contra P. larvae, de diámetro medio de 24,83±2.99 mm con soluciones celulares y de 22,67±2.80 mm con sus metabolitos; 7x108 UFC/mL de Enterobacter sp. (OR500279) formó halos de inhibición de diámetro 27,67±5.05 mm con soluciones celulares y de 26,17±2.48 mm con sus metabolitos; y 1,2x109 UFC/mL de S. epidermidis (PP194265) formó halos de diámetro medio de 25,17±3.43 mm y con sus metabolítos de 30,17±4.54 mm. Se concluye que el pan de polen de ANSA presenta bacterias que inhiben el crecimiento de patógenos de A. mellifera in vitro.