DISEÑO DE UN ANTÍGENO TRIVALENTE PARA SERODIAGNÓSTICO BASADO EN MODELADO ESTRUCTURAL Y PREDICCIÓN DE EPÍTOPES CONFORMACIONALES B DE SIALOALÉRGENOS DE SIMULIUM SP (DIPTERA)

SAIN N; SCHIERLOH P

La Pampa

Congreso; XIII Jornadas de la Asociación Argentina de Inmunología Veterinaria, I Reunión de la Red Latinoamericana de Inmunología Veterinaria.; 2021

Facultad de Veterinaria de la Universidad Nacional de La Pampa

Los jejenes son insectos hematófagos del orden Diptera que, debido a su abundancia creciente y su intensa actividad predatoria diurna sobre el humano y el ganado, están cobrando renovado interés sanitario. Además de su potencial papel como vector de filariasis, la saliva que se inocula durante la picadura puede generar reacciones de hipersensibilidad de tipo I y IV que pueden revestir gravedad. Dado que aún se carece de herramientas para caracterizar esta afección, sedesea obtener el diseño de antígeno recombinante para el desarrollo de un método serodiagnóstico innovador. A partir del proteo-sialoma de 3 especies neotropicales de género Simulium se logró identificar 20 sialoproteinas empleando 2 predictores independientes de alergenicidad basados en redes neuronales artificiales. Estos alérgenos, además de ser expresados en altos niveles en glándulas salivales de Simulidos, no presentan regiones de identidad aminoacídica significativa con humanos, bovinos, caprinos, porcinos, ovinos, equinos ni conejos. 18 de estas proteínas lograronser modeladas satisfactoriamente mediante un algoritmobasado en homología con estructuras experimentales conocidas (Swiss model) mientras que 2 requirieron el uso de un algoritmo de threading basado en co-evolución (coevI-Tasser). A partir de los modelos moleculares obtenidos se identificaron los epítopes B conformacionales con elserver DiscoTope 2.0. Mediante un score desarrollado especialmente que considera parámetros de estabilidad estructural, expresabilidad en E.coli e inmunogenicidad, se diseñó una proteína de fusión trivalente que contiene fragmentos de 3 de los 20 sialoalérgenos. Mediante expresión recombinante en E.coli se espera que la proteína de fusión diseñada sirva como antígeno de cobertura para un test de ELISA indirecto que permita la detección sensible de anticuerpos específicos evocados contra alguno de los 3 sialo-alérgenos predichos como inmunodominantes tras la intensa predación por parte de Simulium sp. en diferentes especies de interés ganadero.