Alteración del Sistema Dopaminérgico Renal en un modelo de hipertensión arterial por sobrecarga de fructosa: utilidad del índice L-dopa/dopamina urinario como predictor de daño renal

NATALIA L RUKAVINA MIKUSIC; KOUYOUMDZIAN, N.M.; DEL MAURO J; CAO, G.; VA TRIDA; GIRONACCI, M.M.; PUYO AM; JORGE E TOBLLI; BELISARIO E. FERNÁNDEZ; CHOI, M.R.

Congreso; Congreso de la Sociedad Argentina de Hipertensión Arterial; 2017

Introducción: El consumo de fructosa en la dieta se ha asociado a varios componentes delsíndrome metabólico, entre ellos al desarrollo de insulino resistencia, dislipidemia ehipertensión arterial (HTA) [1]. Se ha demostrado que una dieta alta en fructosa estimula laabsorción de sodio desde el tracto gastrointestinal e incrementa la reabsorción tubular desodio, procesos que favorecen la retención hidrosalina e impactan sobre los niveles depresión arterial [2]. A su vez, es bien sabido que el riñón es uno de los órganos blanco de laHTA, siendo actualmente la microalbuminuria un indicador precoz de nefropatía y predictorde cardiopatía isquémica en la HTA esencial [3,4]. En este sentido, la insulino resistenciainducida por sobrecarga de fructosa (SF) se encuentra asociada a daño estructural renal,evidenciado por inflamación renal, proteinuria, hipertrofia glomerular, esclerosis y dañotúbulo-intersticial [5,6]. Por otro lado, el sistema dopaminérgico renal (SDR) es un sistemanatriurético local independiente y necesario para mantener el normal equilibrio del sodio yagua corporal y de los niveles de presión arterial [7]. La dopamina (DA) renal desempeña unrol protagónico como hormona autócrina y parácrina en la regulación de la función renal através de la inhibición de diversos transportadores de sodio localizados en los túbulosrenales, principalmente la Na+,K+-ATPasa, enzima cuya alteración está íntimamenterelacionada con la retención salina [8-10]. Existe evidencia a nivel clínico y experimental dela asociación entre alteraciones del SDR y el desarrollo de HTA [11,12]. En estudios previosefectuados en ratas con SF, se han demostrado alteraciones en el SDR, consistentes en unareducción de la captación de L-dopa estimulada por insulina en las células tubularesproximales, y el consecuente aumento de su excreción urinaria [13]. Sin embargo, existepoca evidencia en la actualidad sobre cómo las alteraciones de la DA renal contribuyen enla fisiopatogenia de la HTA por SF, como así también de su posible utilidad como predictordel daño renal observado en el síndrome metabólico.Hipótesis: Los cambios metabólicos y hemodinámicos en la SF se asocian a modificacionesdel SDR que contribuyen a la retención de sodio y al desarrollo de HTA y preceden en eltiempo a la aparición de daño estructural renal. Objetivo: Determinar alteraciones en el SDR mediante el cociente L-dopa/DA urinario y sucorrelación con los niveles de presión arterial y la presencia de microalbuminuria yreducción en la expresión de nefrina como marcadores de daño estructural renal.Metodología: Ratas Sprague Dawley macho (180 grs) se dividieron en dos grupos durante4, 8 y 12 semanas: C: Control (agua para beber) y SF (F al 10%P/V para beber) (n=8 por grupoy período). El día anterior al sacrificio se colocaron en jaulas metabólicas y se determinó enorina de 24 hrs: L-dopa y DA (por HPLC), diuresis, microalbuminuria (definida como 30-300mg albúmina/gr creatinina), sodio y creatinina, y en plasma: triglicéridos, glucemia,colesterol, insulinemia, sodio y creatinina. La PAS se midió por método indirecto. Sedeterminó a nivel renal la actividad específica de la Na+, K+-ATPasa (método de FiskeSubarrow)y sus niveles de expresión por western blot (WB) e inmunofluorescencia. Sedeterminaron los niveles de expresión de los transportadores de L-dopa (LAT-1 y LAT-2), deDA (OCT-2, OCTN-1, OCT-N1/2/3) y del receptor D1 de DA por WB. Paralelamente, seestudiaron los niveles de expresión de los marcadores proinflamatorios (nFκβ, IL-6, TNF-α,TGF-β1) y de daño renal (nefrina) mediante WB.Resultados: La SF se asoció a alteraciones metabólicas dadas por un aumento significativoen los niveles de insulinemia (ng/mL, C4: 0.22±0.022 vs F4: 0.38±0.056*; C8: 0.35±0.042vsF8: 0.58±0.084*; C12: 0.34±0.021 vs F12: 0.589±0.091*) desde la semana 4 así como en losniveles de triglicéridos plasmáticos (mg/dL, C8: 44±8 vs F8: 116±10#; C12: 68±30 vs F12:153±12*) desde la semana 8 de tratamiento. Desde la semana 4, se observó un incrementode la PAS (mmHg, C4: 121±8 vs F4: 145±1*; C8: 130±4 vs F8: 161±10#; C12: 133±5 vs F12:163±4#), y una disminución en la excreción urinaria de sodio por SF (mEq/24 hrs, C4:1.01±0.05 vs F4: 0.83±0.04*; C8: 1.02±0.08 vs F8: 0.72±0.05#; C12: 1.04±0.08 vs F12:0.64±0.04#). Estos cambios fueron acompañados por un aumento significativo en elcociente L-dopa/DA urinario (C4:0,49±0,05 vs F4:1,90±0,09#; C8:0,53±0,06 vsF8:2,35±0,10#; C12:0,54±0,07 vs F12:2,57±0,20#). A su vez se observó una correlaciónpositiva (figura 1) durante las 12 semanas de tratamiento entre los niveles de PAS y elcociente L-dopa/dopamina (R2=0.7816, p=0.002). Estos cambios se acompañaron de unincremento de la actividad específica de la Na+,K+-ATPasa renal (nmol/mg/min, C4: 120±12vs F4: 172±16*; C8: 124±16 vs F8: 186±17*; C12: 140±18 vs F12: 223±21#) como así tambiénen sus niveles de expresión determinados por WB e inmunofluorescencia (figura 2). Elaumento del cociente L-dopa/DA se vio acompañado por una alteración en la expresión delos transportadores de L-dopa y DA mediante WB. Se observó una reducción significativaen la expresión del receptor D1 junto a un aumento significativo en la expresión de nFκβ,IL-6, TNF-α, TGF-β1 desde la semana 4 de SF. La presencia de microalbuminuria se observóen la semana 12 de SF (C12:13.11±1.4 vs F12:57.6±2.5#), junto con una reducciónsignificativa en la expresión de nefrina por WB.*p