Tráfico del receptor Mas a nivel central en la hipertensión arterial

CERNIELLO FM, COSTA MA, GIRONACCI MM.

Congreso; XXXIV Reunión Anual Científica del Consejo Argentino de Hipertensión Arterial; 2013

Objetivos: El sistema renina angiotensina (SRA) consiste en dos ejes contrabalanceados: uno presor constituido por el eje Enzima Convertidora de Angiotensina 1/ Angiotensina II/ Receptor AT1 y un eje depresor constituido por Enzima Convertidora de Angiotensina 2/ Angiotensina-(1-7) (Ang-(1-7))/ Receptor Mas (R Mas). Múltiples estudios han demostrado que en la hipertensión arterial existe un desbalance entre ambos brazos del SRA, tanto por sobreactivación del eje presor como por una menor actividad del eje depresor. Esta menor actividad podría estar dada por una regulación diferencial del R Mas en la hipertensión arterial. Para evaluar esta hipótesis, en el presente trabajo se estudió el tráfico del R Mas a nivel central en un modelo animal de hipertensión arterial. Materiales y Métodos: Se obtuvieron cultivos primarios de neuronas de hipotálamo y tallo cerebral de ratas espontáneamente hipertensas (SHR) y de ratas normotensas (WKY) de 1-4 días. Las células fueron incubadas con Ang-(1-7) (1μM) durante 15 o 30 min a 37°C. Un grupo de células fueron preincubadas 45 min a 37°C con una sonda fluorescente marcadora de lisosomas (Lysotracker). Luego, las neuronas fueron fijadas con paraformaldehído 4% y metanol. Se determinó el direccionamiento del R Mas a lisosomas o al núcleo celular por colocalización de este con Lysotracker o Hoechst, respectivamente, utilizando microscopía confocal. La colocalización en cada caso fue evaluada calculando los coeficientes de Manders (colocalización positiva con coeficientes de Manders mayores a 0.6). Resultados: Luego de estimular las células con Ang-(1-7) durante 15 y 30 min no se observó colocalización del R Mas con los lisosomas tanto en neuronas obtenidas de hipotálamo y tallo cerebral de WKY como de SHR. Sin embargo, luego de un estímulo de 30 min con Ang-(1-7) se observó colocalización del R Mas con el núcleo celular en las neuronas de SHR (coeficiente de Manders 0.68 ± 0.015, n=11). Por el contrario, en las neuronas obtenidas de hipotálamo y tallo cerebral de WKY no se observó colocalización del R Mas con el núcleo a los tiempos ensayados. En todos los casos se evaluó la colocalización del R Mas con el núcleo o con los lisosomas en condiciones basales, sin estímulo con Ang-(1-7), y no se observó colocalización. Conclusiones: El R Mas presenta una regulación diferencial en cuanto a su tráfico: es direccionado hacia el núcleo en las neuronas de hipotálamo y tallo cerebral de SHR mientras que en las normotensas no. Aún resta esclarecer esta regulación diferencial y evaluar si esta contribuye en parte al estado hipertensivo de este modelo animal.