INVESTIGADORES
ZANETTI Flavia Adriana
congresos y reuniones científicas
Título:
DESARROLLO Y CARACTERIZACIÓN DE VECTORES VACUNALES QUE EXPRESAN LA PROTEÍNA NEF DEL INTERSUBTIPO BF DE HIV-1
Autor/es:
RODRÍGUEZ, A. M.; TURK, G.; ZANETTI, F.; FERRER, M. F.; NÀJERA, J. L.; MÓNACO; SCHULMAN, G.; PASCUTTI, M. F.; CALAMANTE, G.; ESTEBAN, M.; SALOMÓN, H.; GHERARDI, M. M.
Lugar:
Ciudad de Paraná, Entre Ríos, Argentina
Reunión:
Congreso; CONGRESO NACIONAL DE SIDA-2007; 2007
Resumen:
El objetivo de este trabajo fue el desarrollo y caracterización de vectores génicos y virales que se emplearán para analizar la inmunidad celular subtipo específica frente a antígenos del intersubtipo BF. El gen Nef BF fue amplificado por PCR a partir del genoma viral de la forma circulante CRF_12BF y clonado en un vector ADN. La expresión de la span proteína se analizó en células humanas y murinas mediante Western Blot. Por otro lado, el vector recombinante basado en la cepa atenuada del virus vaccinia (MVA), se generó mediante la infección-transfección con un vector de transferencia en el que el gen NefBF se subclonó bajo el promotor sintético de vaccinia E/L, flanqueado por regiones genómicas viral, promotoras de la recombinación. El MVANefBF se purificó tras 8 ciclos infección y selección. Posteriormente, su caracterización implicó el análisis de su pureza con una PCR diferencial, evaluación de la estabilidad del gen recombinante tras 10 pases, y cinéticas de expresión y replicación evaluadas en líneas celulares permisivas y no permisivas para MVA. En este trabajo se muestra la obtención y caracterización de vectores génicos y basados en el vector atenuado MVA que se utilizarán en ensayos in vivo en ratones. Éste es un avance en el desarrollo de inmunógenos usando antígenos del intersubtipo BF de HIV.