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El virus de la enfermedad infecciosa de la bolsa (IBDV) es el agente etiológico de una enfermedad altamente contagiosa e inmunosupresora que afecta a pollos jóvenes. El virus puede generar perdidas económicas en la avicultura de manera directa (por infección de aves con cepas virulentas) o de forma indirecta (por favorecer infecciones oportunistas y/o disminuir la respuesta inmune contra vacunas para otros patógenos aviares). El control de la enfermedad infecciosa de la bolsa (IBD) se realiza mediante vacunación con cepas atenuadas; complejos antígeno-anticuerpo o vectores virales que portan la secuencia codificante de la proteìna viral 2 (VP2) de IBDV. En este contexto, es necesario monitorear el nivel de anticuerpos anti-IBDV (pre y postvacunación) de numerosas muestras de suero utilizando metodologías rápidas, simples y confiables. Existen algunos enzimoinmunoensayos (ELISA) comerciales que cumplen con estos requisitos pero todos ellos son importados. Por este motivo, el objetivo del presente estudio fue desarrollar un ELISA, en formato indirecto, utilizando como reactivo antigénico una versión recombinante de la proteína VP2 madura, principal inmunógeno de IBDV. Su secuencia codificante se clonó en un vector de expresión procarionte quedando fusionada, en su N terminal, a una secuencia de 6 histidinas (His-VP2). Luego, se expresó en E. coli en niveles elevados y se recuperó a partir de cuerpos de inclusión bacterianos utilizando un método simple, económico y eficiente, sin necesidad de realizar una purificación adicional mediante cromatografía de afinidad con iones metálicos inmovilizados. Una vez establecidas las condiciones óptimas del ELISA-VP2 (concentración de His-VP2 para recubrir las placas, diluciones de sueros y de anticuerpo secundario conjugado, temperatura y tiempos de incubación, número de lavados, etc.) se evaluó su desempeño utilizando sueros provenientes de pollos libres de patógenos específicos (SPF) como así también de pollos parrilleros vacunados contra IBDV que fueron previamente analizados y clasificados con un kit de ELISA comercial. De este modo se determinó que el ELISA-VP2 posee una sensibilidad y especificidad relativas del 99% y 98%, respectivamente; y un alto valor de concordancia con el ELISA comercial (coeficiente de correlación Kappa = 0,999). La especificidad analítica del ELISA-VP2 se confirmó mediante el análisis de sueros con reactividad para otros patógenos. Finalmente, el ELISA desarrollado demostró ser reproducible ya que los porcentajes máximos obtenidos en los coeficientes de variación (% CV) intra (4,34 %) e interensayo (5,39 %) estuvieron dentro de los parámetros establecidos por la Organización Mundial de Sanidad Animal (% CV ≤ 10 y ≤ 20, respectivamente). En conclusión, a futuro, la producción nacional del ELISA-VP2 podría escalarse y usarse como un método de diagnóstico alternativo y eficiente para monitorear el estado serológico contra IBDV en poblaciones de pollos de granjas de producción.

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