IBBEA   24401
INSTITUTO DE BIODIVERSIDAD Y BIOLOGIA EXPERIMENTAL Y APLICADA
Unidad Ejecutora - UE
congresos y reuniones científicas
Título:
La familia de subtilisinas de cebada y su expresión génica en distintos tejidos
Autor/es:
ROBERTS, IRMA; WIRTH, SONIA; RODRÍGUEZ, MARÍA ISABEL
Lugar:
Buenos Aires
Reunión:
Jornada; Exactas y el agro: aportes a la actividad agropecuaria y agroindustrial; 2019
Institución organizadora:
Facultad de Ciencias Exactas y Naturales UBA
Resumen:
Durante la senescencia de la planta es muy importante la actividad de las proteasas que actúan en la removilización de nitrógeno. El conocimiento de su función, distribución y patrones de expresión es de particular interés para el desarrollo biotecnológico de variedades de cereales con mayor eficiencia de removilización de nitrógeno. Dentro de las serín-proteasas, una de las familias más importantes es la de las subtilisinas (S8). En plantas, las subtilisinas están asociadas a numerosos aspectos del crecimiento y desarrollo pero aun es poco lo que se conoce sobre esta familia de proteasas en cebada (Hordeum vulgare). En este trabajo, mediante el análisis in silico de las secuencias genómicas de H. vulgare y de la especie modelo Brachypodium distachyon, identificamos 40 y 60 genes potencialmente codificantes de subtilisinas, respectivamente. El análisis filogenético de estas secuencias y de las disponibles en arroz reveló una alta homología y correspondencia en la organización en ?clusters? de dichos genes indicando que se trata de una familia muy conservada en los cereales. El análisis de las secuencias proteicas predichas mostró que todas contienen el dominio PA (PA_subtilisin_like) aunque algunas carecen del dominio I9, el cual actúa como chaperona interna e inhibidor de la proteasa en el zimógeno. La expresión de los 40 genes de cebada se analizó mediante RT-qPCR en espigas, aristas, tallo, hoja verde y hoja senescente de plantas en estado reproductivo y coleoptile, raicillas y grano desbrotado de 4 días de germinación, mostrando expresión diferencial asociada a algún estadío de desarrollo y/o tejido en particular, lo cual sugiere una amplia diversidad funcional para este grupo enzimático. Se determinó además la concentración de proteínas, aminoácidos libres y actividad de subtilisinas utilizando el péptido sintético AAPFpNA, un sustrato específico. Los resultados mostraron una mayor actividad de subtilisinas en los granos de 4 d de germinación y tejidos senescentes, evidenciando una relación entre la actividad de estas enzimas y los tejidos en los que tiene lugar una activa removilización de nitrógeno.