Desarrollo de Paspalum dilatatum resistente a Claviceps paspali mediante el uso de herramientas biotecnológicas

MOYANO LAURA; COSSIO LEANDRO; ZELADA ALICIA; SCHRAUF GUSTAVO

Jornada; Exactas y el agro: aportes a la actividad agropecuaria y agroindustrial; 2019

FCEN-UBA

Paspalum dilatatum es uno de los recursos forrajeros más importantes de América del Sur; es una gramínea C4 nativa de Sudamérica ampliamente distribuida en regiones tropicales y subtropicales del mundo. Es muy apreciada por su vigor, su tolerancia a heladas y estrés hídrico. Su sistema reproductivo (apomixis) resulta una barrera para la aplicación de metodologías clásicas de mejoramiento, resultando la transformación génica la alternativa ideal. Uno de los problemas más relevantes de la especie es la baja producción y mala calidad de sus semillas. La principal causa de esto es la susceptibilidad de la especie a Claviceps paspali, un hongo que ataca sus inflorescencias reemplazando las semillas por sus esclerocios. Las opciones de manejo para C. paspali son limitadas porque no hay resistencia genética dentro de la especie apomíctica pentaploide y los tratamientos con fungicidas resultan ineficientes. El objetivo de este trabajo es generar plantas de P. dilatatum capaces de resistir la infección por C. paspali mediante el desarrollo de eventos transgénicos que expresen genes con actividad antifúngica sólo en los tejidos que infecta el hongo. Hasta el momento, hemos aislado y caracterizado dos promotores de genes de Sorghum bicolor que se expresan específicamente en estigma, los cuales serán utilizados para guíar la expresión de los péptidos antimicrobianos. Por otra parte, hemos identificado y clonado 4 genes de S. bicolor que codifican putativos péptidos antimicrobianos, dos snakinas y dos defensinas. La capacidad de los genes antifúngicos para inhibir el crecimiento de C. paspali se evaluará in vitro y se seleccionarán aquellos candidatos cuya efectividad ante el hongo sea mayor. Se analizará la posibilidad de un efecto sinérgico por la co-expresión de snakinas y defensinas. Se desarrollarán vectores de transformación para P. dilatatum que permitan la expresión de los genes antimicrobianos seleccionados tanto en forma constitutiva como tejido específica y se procederá a transformar mediante biobalística. Se caracterizarán las líneas transgénicas obtenidas y se comparará la eficacia de las dos estrategias de expresión en cuanto a su capacidad de generar resistencia a la infección por C. paspali.