IBBEA   24401
INSTITUTO DE BIODIVERSIDAD Y BIOLOGIA EXPERIMENTAL Y APLICADA
Unidad Ejecutora - UE
congresos y reuniones científicas
Título:
Biosensores para la detección de derivados fenólicos basados en actividad lacasa de dos isoformas de Trametes trogii y Rhus vernicifera
Autor/es:
BORON, IGNACIO; WIRTH, SONIA; BATTAGLINI, FERNANDO
Lugar:
Cordoba
Reunión:
Congreso; VI Congreso Argentino de la Sociedad de Toxicología y Química Ambiental de Argentina; 2016
Institución organizadora:
Sociedad de Toxicología y Química Ambiental de Argentina
Resumen:
El fenol y sus derivados representan un conjunto de compuestos de gran relevancia en nuestras vidas que van desde señales químicas en nuestro sistema neuroendocrino a residuos de la actividad agrícola e industrial. Si bien existen métodos cromatográficos sensibles para la determinación de estos compuestos, la electroquímica ofrece oportunidades en el desarrollo de metodologías in situ de bajo costo para su uso en muestras acuosas naturales.Las lacasas son un grupo de enzimas capaces de oxidar compuestos fenólicos de diferente naturaleza. La enzima ha sido aislada por primera vez del árbol de laca japonés (Rhus verniciflua) y más tarde de una variedad de hongos, insectos y bacterias. Una de sus variantes más comunes proviene del hongo Trametes Trogii, que a su vez posee cuatro isoformas para la misma enzima.Es posible construir biosensores basados en la actividad catalítica de lacasa donde la enzima es la encargada de oxidar el derivado fenólico, para que luego el derivado quinónico sea reducido electroquímicamente, registrándose por amperometría la señal amplificada.Nuestro grupo viene realizando una serie de trabajos con el sistema polietilenimina-dodecilsulfato para la construcción de electrodos modificados, incorporando la modificación con nanopartículas de sílica y unión a Ni2+ como parte del andamiaje que permite adsorber alternativamente la enzima. En este trabajo nos propusimos estudiar la combinación de estrategias de anclaje con diversas fuentes de enzima como son la lacasa de Rhus verniciflua e isoformas 1 y 3 de la lacasa del hongo Trametes Trogii.Los sistemas construidos se caracterizaron por técnicas bioquímicas y electroquímicas, estudiando la sensibilidad en la detección de catecol y dopamina. Los resultados indican que la combinación adecuada de estrategias de anclaje, fuente y tipo de lacasa permiten la construcción de biosensores optimizados para la detección de derivados fenolicos.El biosensor basado en lacasa de Rhus verniciflua permitió detectar dopamina en el orden de los μmol/L a pH fisiológico. Ambas isoenzimas de Trametes Trogii poseen un pH óptimo moderadamente acido, sin embargo la isoforma 1 mostró mayor sensibilidad y menor límite de detección frente a catecol, mientras que la isoforma 3 presento un valor de pH optimo intermedio. En conjunto la batería de biosensores construidos permiten barrer un rango de pH que va de 4,5 a 7.