IBBEA   24401
INSTITUTO DE BIODIVERSIDAD Y BIOLOGIA EXPERIMENTAL Y APLICADA
Unidad Ejecutora - UE
congresos y reuniones científicas
Título:
EL ENDOSULFAN AFECTA LA DESCONDENSACIÓN DE LA CROMATINA DEL NÚCLEO ESPERMÁTICO DE RATÓN.
Autor/es:
MELISA SANCHEZ; FABIANA LO NOSTRO; MARINA ROMANATO; VANINA JULIANELI; LUCRECIA CALVO; JUAN CARLOS CALVO; VANINA FONTANA
Lugar:
Mar del Plata
Reunión:
Congreso; LVIII Reunión de la Sociedad Argentina de Investigacion Clínica; 2013
Institución organizadora:
SAIC SAFIS SAFE
Resumen:
Justificación La descondensación de la cromatina espermática es requisito para la singamia y requiere la tiorreducción de disulfuros de protaminas asociadas al ADN y el intercambio con histonas ovocitarias. Pesticidas como el endosulfán podrían alterar este proceso. Objetivos Evaluar en sistema murino el efecto del endosulfán sobre la descondensación de la cromatina espermática. Metodología Se obtuvieron espermatozoides epididimarios de ratones CF-1, y se incubaron con concentraciones crecientes de endosulfán puro o formulado (100 pM a 100 µM), usando medio o DMSO como controles. Para evaluar la descondensación, se  incubaron  1-2 x106 espermatozoides con Heparina y GSH durante distintos tiempos a 37 °C en 5% CO2. Se fijaron con glutaraldehído al 2% y se determinó en microscopio con contraste de fase el porcentaje de espermatozoides descondensados. Se analizó el estado redox de las protaminas asociadas al DNA espermático incubando con endosulfán (100 µM) y medio o DMSO utilizando el reactivo monobromobimane (mBBr), observando con microscopio de fluorescencia y analizando con el programa Image J. Los experimentos se realizaron  por duplicado evaluando 200 células en cada muestra. Resultados y conclusiones El endosulfán puro produce un aumento significativo de la descondensación cuando los espermatozoides se incuban con una concentración de 1 µM y 100 µM (p<0.05 y p<0.001 respectivamente versus GSH + Heparina). Al utilizar endosulfán comercial solo se ve diferencia con la concentración más alta (100 µM) (p<0.001). Al evaluar el efecto de este pesticida sobre el estado redox de las protaminas no se obtuvieron diferencias significativas entre los controles y los tratamientos. Los resultados obtenidos descondensando in vitro espermatozoides previamente incubados con endosulfán, manifiestan  que este modelo podría utilizarse como centinela para evaluar  posibles efectos de tóxicos ambientales.