ACTIVIDAD DE TRIPSINA EN HEPATOPÁNCREAS DEL CANGREJO VIOLINISTA UCA TANGERI: ESTUDIO DE CARACTERIZACIÓN PARCIAL Y MODULACIÓN POR BAJA Y ALTA SALINIDAD.

MANCERA J.M.; ASARO A.; LÓPEZ MAÑANES A.A.

MAR DEL PLATA

Jornada; XII Encuentro Biólogos En Red; 2017

La tripsina, es la principal y más abundante endopeptidasa encontrada en hepatopáncreas de crustáceos decápodos. A pesar de su rol central en la digestión de proteínas, es escaso el conocimiento sobre sus características bioquímicas y modulación en cangrejos eurihalinos. En marismas de la Bahía de Cádiz, España, Uca tangeri está expuesto a amplios cambios en la salinidad ambiental. Sin embargo, faltan estudios sobre su fisiología digestiva y posibles ajustes digestivos en relación a la salinidad. Los objetivos fueron determinar: a) la existencia y características bioquímicas de tripsina; y b) el efecto de la salinidad ambiental sobre la actividad de tripsina en hepatopáncreas de U. tangeri. Machos adultos (n=5-8 individuos por condición) fueron mantenidos una semana bajo condiciones de laboratorio a 33? de salinidad (S) (osmoconformación) (caracterización) así como a 12 y 55?S (hiper/hipo-regulación, respectivamente). Se trabajó con sobrenadante (10000xg 15 min) de homogenato de hepatopáncreas (Tris-HCl 0,1M, pH 7,4) (4 ml x g de tejido-1). La actividad de tripsina se cuantificó por hidrólisis de BAPNA en buffer Tris 50 mM a 45ºC (curva pH: 4,5-10,0; curva de T: 4-45°C; curva de sustrato: BAPNA= 0,06-2,32 mM; salinidad: pH=7,4; T= 45°C; BAPNA=1,16 mM), y se expresó como µmoles x min-1 x mg prot-1. La máxima actividad de tripsina se encontró a pH 7,4 y a 45°C y exhibió una cinética michaeliana (Km=0,22±0,04). La actividad de tripsina en hepatopáncreas de individuos expuestos a 12?S fue similar (1,73±0,10) a la actividad en 33?S (1,84±0,10), mientras a 55?S fue menor (alrededor de 21%; 1,45±0,08) que en 33?S (ANOVA; gl=22; F=3,95; p=0,036). Los resultados que muestran la existencia de actividad de tripsina en hepatopáncreas de U. tangeri y su modulación por alta salinidad sugiere la capacidad para la digestión de sustratos proteicos y de ajustes diferenciales en la misma en relación a la hipo-regulación.