Visualización y estudio de estructuras esclerotizadas de dactilogíridos (Monogenea): comparación de tres métodos, Hoyer?s, SDS y Proteinasa K

ROSSIN M. ALEJANDRA; IRIGOITIA MANUEL; TIMI JUAN TOMÁS

Bariloche

Congreso; Congreso Argentino de Parasitologia; 2015

Universidad Nacional del Comahue

La identificación de especies de monogeneos se basa principalmente en el estudio de la morfología de estructuras esclerotizadas. Estas estructuras son muy pequeñas, especialmente en Dactyrogyridae (20-130 µm según la especie) y se encuentran inmersas en el tejido corporal. Su estudio debe realizarse mediante procedimientos que permitan la transparencia de partes blandas y evidencien las partes duras. Diferentes métodos han sido propuestos, pero resultan ser dificultosos para el estudio de estos pequeños monogeneos. Este trabajo compara y analiza las imágenes obtenidas en el microscopio óptico luego de la utilización de 3 métodos de diafanización y digestión, utilizándose dactilogiridos fijados en formol 5% y alcohol 70%. 1) Hoyer?s, método clásico utilizado para aclarar partes blandas 2) SDS (Dodecilsulfato sódico) 5%, detergente aniónico, que desnaturaliza proteínas y solubiliza membranas biológicas 3) proteinasa K, digestión enzimática. Los resultados obtenidos permitieron comparar y optimizar el uso de 1, 2 y 3. 1) permitió obtener imágenes difusas, sin detalle y que continúan aclarándose con el paso del tiempo; 2) imágenes nítidas, definidas y con gran detalle permitiendo posteriormente tinciones de partes blandas; 3) degradación total de partes blandas e individualización de ganchos y MCO, obteniéndose imágenes definidas con detalles estructurales que pudieron ser observados en todas sus dimensiones. Se concluye que el uso de SDS junto con proteinasa K son métodos sencillos que brindan imágenes al microscopio óptico de una gran calidad de detalle y que pueden ser utilizados de rutina para el estudio dichas estructuras, tanto para la identificación como la descripción de nuevas especies.