IFLP   13074
INSTITUTO DE FISICA LA PLATA
Unidad Ejecutora - UE
congresos y reuniones científicas
Título:
Hipertermia magnética intracelular en la línea cancerígena A549
Autor/es:
P. GIRARDIN; DE SOUSA, ELISA; FERNÁNDEZ VAN RAAP, M. B.; GOYA R. ; SOSA Y.; H. F. SANCHEZ; G. PASQUEVICH
Lugar:
San Miguel de Tucuman
Reunión:
Workshop; solidos2011; 2011
Resumen:
Hipertermia magnética intracelular en la línea cancerígena A549 P. Girardin1, E. de Sousa1, M.B. Fernández van Raap1*, P.,Mendoza Zelis1, R. Goya R2, Y. Sosa2, F. H. Sánchez1 y G. Pasquevich1 1 IFLP-CONICET La Plata, Argentina. 2 INIBIOLP-Patología B ? CONICET Facultada de Medicina de la UNLP, La Plata, Argentina. *raap@fisica.unlp.edu.ar En el presente trabajo se discuten experimentos de hipertermia magnética intracelular (HMI) [1]. La hipertermia magnética es una alternativa terapéutica viable para tratar tumores cancerígenos en forma menos invasiva. La elevación de la temperatura del tejido induce la apoptosis selectiva de las células cancerígenas. La HMI se genera mediante la aplicación de un campo de radiofrecuencia en células que han internalizado nanopartículas magnéticas, es decir el nanocalefactor está localizado en endosomas del citoplasma. Las nanopartículas monodominio absorben energía y la disipan al medio. A fin de diferenciar los efectos de las HM intracelular y extracelular, que dependen de la localización del nanocalefactor (NPM), y discernir los efectos térmicos y mecánicos que producen en las células las NP internalizadas cuando se las somete a un campo de RF se realizaron experimento in vitro en la línea celular A549 ( adenocarsinoma de pulmón humano). Las NMP utilizadas fueron sintetizadas por co-precipitación en suspensión acuosa a pH fisiológico 7.4 y concentración de 21,32 mg/ml según titulación redox, presentan un ciclo de histéresis modelable con una Langevin característico del comportamiento superparamagnético con magnetización de saturación de 70 emu/g y tamaño de cristalita de 17 nm. Las nanopartículas de magnetita en forma de ferrofluido acuoso a pH fisiológico 7.4, fueron internalizadas en células de la línea A549 ( adenocarsinoma de pulmón humano) para distintas concentraciones de magnetita en medio de cultivo 20 y 50 µg/ml. Se observó mediante TEM que las NPM se incorporan en la célula en forma no específica por endocitosis, localizándose en compartimentos del citoplasma. Se determinó para 20 µg/ml , una incorporación entre 20 pg/célula mediante dos determinaciones independientes de VSM y espectrofotometría. Se utilizó el método de doble tinción con Naranja de Acridina y Bromuro de Etídio, utilizando el microscopio de fluorecencia para diferenciar células viables, de necróticas y apoptoticas después de internalización con las concentraciones mencionadas y después de tratamiento por HM a 170 kHz y 320 Oe. Se caracteriza el mecanismo de internalización con TEM, microscopías óptica con contraste de fase, AFM/MFM y fluorescencia y se discute la eficiencia de la HMI para producir apoptosis en relación a la citotoxicidad de las nanopartículas. [1] J. P. Fortin et al., Eur. Biophys J. 37, 223, (2008).