Reducción de biofilms de Candida tropicalis por la acción fotodinámica de rubiadina, una antraquinona natural

COMINI LAURA R.; SUSANA NUÑEZ MONTOYA; CABRERA JOSÉ L.; MARIONI JULIANA; PARAJE MARÍA GABRIELA

Jornada; VII JORNADAS DE POSGRADO. 1º JORNADA DE CIENCIA Y TECNOLOGÍA. FACULTAD DE CIENCIAS QUÍMICAS. UNC; 2016

Previamente, hemos demostrado que los extractos con alto contenido de antraquinonas (AQs) de Heterophyllaea pustulata Hook f. (Rubiaceae), exhiben actividad antifúngica in vitro sobre biofilms de Candida. Además, hemos comprobado que las AQs purificadas de los extractos bioactivos presentan propiedades fotosensibilizantes La actividad antifúngica de Rubiadina (RUB), una de las AQs mayoritaria de estos extractos, se evaluó sobre el biofilm de Candida tropicalis, analizando si su efecto podría incrementarse por la irradiación y, estudiando su relación con la generación de especies reactivas del oxígeno y del nitrógeno.RUB fue aislada del extracto bencénico e identificada por sus datos espectrales (UV-Vis, RMN, EM). La cuantificación del biofilm se realizó a partir del método descripto por O´Toole y Kolter en C. tropicalis NCPF 3111 y C. tropicalis clínica. RUB se testeó a cuatro concentraciones por triplicado, bajo oscuridad e irradiación. El sobrenadante se utilizó para medir la producción de anión superóxido (O2?-) por la reacción de Nitro-Blue tetrazolium (NBT), y la generación de óxido nítrico (ON) mediante el reactivo de Griess. La capacidad antioxidante total del sistema se determinó por el ensayo FRAP y la activación de SOD por el ensayo NBT. Anfotericina B (Amp- B) se utilizó como control.RUB disminuyó la formación del biofilms de ambas cepas sólo bajo la acción de la luz, siendo el porcentaje de reducción (% R) en la cepa clínica (82,1 ± 3,0%) mayor que el observado en la cepa de referencia (63,5 ± 4,5%) a la misma concentración (1,98 g / ml); incluso RUB logró un % R mayor que Amp B (61,2 ± 4,8% a la CIM). La disminución observada en ambos biofilms se correlacionó con un aumento en la producción de O2?- y ON. Por otra parte, no se observó activación de SOD, pero hubo un aumento en el sistema antioxidante total. En conclusión, la actividad antifúngica in vitro de RUB contra los biofilms de C. tropicalis está mediada por un mecanismo fotodinámico: la producción O2?- (Tipo I), junto con la activación del sistema antioxidante total que no permite la eliminación completa del biofilm. Por lo tanto, sería prometedor evaluar el efecto de períodos consecutivos de irradiación para lograr la erradicación del mismo.