Detección de especies reactivas y evaluacion de daño oxidativo de proteinas inducido por linezolid en Staphylococcus aureus

SILVERO MJ; MARTINEZ SR; BECERRA MC

Cba

Congreso; VI Congreso Internacional de Ciencias Farmaceuticas; 2015

DETECCION DE ESPECIES REACTIVAS Y EVALUACION DE DAÑO OXIDATIVO DE PROTEINAS INDUCIDO POR LINEZOLID EN STAPHYLOCOCCUS AUREUSSilvero Jazmin b,c; Martínez Sol a,b; Becerra María Cecilia a,b. a IMBIV-CONICETb Departamento de Farmacia, Facultad de Ciencias Químicas, Universidad Nacional de Córdoba, Córdoba, Argentinac INFIQC-CONICETE-mail : jazmincompagnucci@gmail.comStaphyloccoccus aureus es un patógeno de gran relevancia clínica, las cepas resistentes a meticilina (SAMR) provocan infecciones hospitalarias o asociadas a la comunidad. Una de las alternativas terapéuticas lo constituye el Linezolid (LZD), antibiótico perteneciente a un nuevo grupo, las oxazolidinonas. Objetivo:El objetivo de este trabajo fue profundizar el estudio del mecanismo de acción de LZD mediante la evaluación de la generación de especies reactivas del oxígeno y del nitrógeno, como así también el impacto que tienen estos radicales en macromoléculas, particularmente proteínas.Materiales y métodos:Se determinó la concentración inhibitoria mínima (CIM) de acuerdo a las normas del Clinical Laboratory Standart Institute en cepas de S.aureus ATCC 29213 y S.aureus meticilino resistente ATCC 43300 (SAMR). Se evaluó la producción de especies reactivas del oxígeno y del nitrógeno por espectrofluorometría utilizando la sonda fluorescente 1,2,3-dihidrorodamina (DHR). Además, se cuantificaron los productos proteicos de oxidación avanzada (AOPP) mediante espectrofotometría.Resultados: Los valores de CIM para S.aureus ATCC 29213 y SAMR fueron de 2 µg/mL y 1 µg/mL, respectivamente. La mayor producción de especies reactivas para SAMR fue de 187 % respecto del basal (control negativo) a las 4 h de tratamiento y a la CIM, mientras que para S.aureus ATCC 29213, el incremento fue de 266% y se detectó a las 24 h de incubación a la CIM.Cuando se cuantificaron los AOPP, los valores máximos se obtuvieron luego de 24 h de incubación en ambas cepas y a concentraciones subCIM; para S.aureus ATCC 29213 el porcentaje de daño respecto del basal fue de 114% a la concentración de 0,25 µg/mL, mientras que para SAMR fue de 150% a la misma concentración.Conclusión: En base a los resultados obtenidos, se puede concluir que la generación de radicales en ambas cepas fue diferente, detectándose el máximo valor a la CIM pero a diferentes tiempos de incubación; sin embargo, la mayor oxidación de proteínas se obtuvo a la subCIM. Si bien se ha descripto que LZD actúa en los ribosomas bacterianos, la oxidación de macromoléculas constituye un aspecto novedoso en el mecanismo de acción, no descripto al presente.