Efecto antifúngico de la combinación de nanopartículas de plata con Anfotericina B en biofilms de Candida glabrata.

PARAJE MG; GALERA ILD; PÁEZ, PAULINA L

QUíMICA VIVA

DEPARTAMENTO DE QUÍMICA BIOLÓGICA, FACULTAD DE CIENCIAS EXACTAS Y NATURALES, UNIVERSIDAD DE BUENOS AIRES

Lugar: Buenos Aires; Año: 2019

1666-7948

Candida es un patógeno oportunista que provoca infecciones superficiales y sistémicas en el hospedero, siendo una causa importante de morbi-mortalidad. Candida glabrata es una levadura emergente, frecuentemente aislada en candidasis, candiduria y micosis sistémicas. La formación de biofilm le otorga patogenicidad y resistencia, lo que podría conducir al fracaso de distintas estrategias terapéuticas. Los avances en nanoantimicrobianos son prometedores; recientemente se ha informado sobre la actividad antifúngica de nanopartículas de plata (NPsAg) en algunas especies de Candida en estado planctónico, la acción bactericida y la virucida. Sin embargo, poco se ha reportado sobre su efecto antibiofilm. El objetivo de este trabajo fue evaluar el efecto de las NPsAg biosintetizadas y en combinación con Anfotericina B (AmB) sobre el biofilm inicial y maduro de C. glabrata.La concentración inhibitoria mínima (CIM) y la concentración fungicida mínima (CFM) de NPsAg y AmB para células planctónicas de C. glabrata ATCC 2001, se determinaron mediante el método de microdilución en caldo para levaduras según CLSI M27-4ta ed. Los porcentajes (%) de inhibición y de erradicación del biofilm se evaluaron sobre las etapas iniciales de la formación de biofilm y sobre el biofilm maduro (48 h) en placa de 96 pocillos, siendo expuesto a AmB (400CIM) y a concentraciones de NpsAg (supraCIM, CIM y subCIM). Además se realizaron combinaciones a diferentes concentraciones de NpsAg (25CIM, 50CIM y 100CIM) con diferentes concentraciones de AmB (100CIM, 200CIM y 400CIM). Se realizó tinción con cristal violeta definiendo 0,1 DO492nm = 1 Unidad de Biomasa de Biofilm. El número de unidades formadoras de colonias por mililitro (UFC/ml) se obtuvo por recuento de células viables del biofilm en las distintas condiciones. El mismo valor CIM y CFM fue encontrado para NPsAg (0,125 pM) y AmB (5,4 x 105 pM). El % de inhibición del biofilm fue del 85 % para NPsAg y AmB (100 y 400 CIM respectivamente), no mostrando inhibición significativa en las combinaciones. Las NPsAg tuvieron un % de erradicación del biofilm maduro del 70% para la concentración 600 CIM y 40% para 100 CIM, mientras que AmB (400CIM) alcanzó el 65%. Con la combinación de NPsAg y AmB (100 CIM NPsAg y 400 CIM AmB) se obtuvo un 87%. Los resultados del recuento de UFC/ml en biofilm de C. glabrata tratado, mostraron una buena correspondencia con el % de erradicación del biofilm ensayado con cristal violeta. Se demostró actividad fungicida de NpsAg en C. glabrata y se logró mayor reducción del biofilm maduro cuando se expuso a combinaciones de NPsAg con AmB. Estos resultados son prometedores, ya que lograr sinergia entre Amb y NPsAg podría contribuir a una estrategia antibiofilm. Además, se abren nuevas perspectivas para próximas investigaciones, donde las NPsAg podrían ser antifúngicos efectivos para la prevención o el tratamiento de infecciones causadas por Candida.