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Philodryas patagoniensis es una serpiente opistoglifa, extensamente distribuida en América del Sur y en especial en Argentina. Envenenamientos causados por este ofidio se caracterizan principalmente por trastornos de la coagulación sanguínea. Análisis mediante SDS-PAGE han demostrado que su veneno es capaz de degradar completamente la cadena Aα del fibrinógeno en tan sólo 5 min, y la cadena Bβ sólo después de 30 min de incubación. Debido a que la estructura de las redes de fibrina es influenciada por la calidad del fibrinógeno, en este trabajo se evaluaron los cambios morfológicos de redes de fibrina, en la presencia y ausencia de plaquetas, inducidos por el veneno de P. patagoniensis mediante microscopía electrónica de barrido (MEB). A tal efecto, se incubaron 20 μL de PRP (plasma rico en plaquetas) humano o fibrinógeno de plasma humano (Sigma, USA) con 10 μL de veneno de P. patagoniensis (concentración final de 4 o 2 mg/mL) o solución salina tamponada con fosfatos (PBS; pH 7,2) en el caso del control, a 37ºC en atmósfera húmeda durante dos intervalos de tiempo (5 y 60 min) sobre membranas del tipo millipore de 0,2 μm. Pasado el tiempo de incubación se agregó 20 μL de trombina y se incubó a 37ºC en atmósfera húmeda durante 10 min para permitir la formación de la red de fibrina. Posteriormente, se colocaron las membranas conteniendo los coágulos formados a partir de PRP en un recipiente conteniendo PBS, agitándose magnéticamente durante 2 h con el fin de eliminar las proteínas plasmáticas que pudieron haber quedado retenidas en la red. A continuación, las muestras fueron fijadas en glutaraldehído al 2,5% tamponado a pH 7,2 con PBS durante 1 h. Por último se enjuagaron las muestras en PBS, antes de ser transportadas al Servicio de Microscopía Electrónica de Barrido de la UNNE. Los resultados mostraron que el veneno de P. patagoniensis afecta la estructura de la red de fibrina formada tanto a partir de PRP como de fibrinógeno comercial. Cuando se pre-incubó PRP con ambas concentraciones del veneno durante 5 min no se observó cambios significativos en la estructura de la malla de fibrina comparada con el control. Sin embargo, luego de 60 min de incubación, la red de fibrina se caracterizó por una estructura heterogénea, presentando zonas con arquitectura compacta, y otras con una estructura más abierta en relación al control. Cuando se pre-incubó fibrinógeno comercial con veneno (2 mg/mL) durante 5 min, la malla proteica presentó en algunas zonas una estructura más abierta y porosa comparada con el control, y en otras sólo grumos de fibrina. Con la mayor concentración de veneno (4 mg/mL) no se observó el patrón filamentoso de la fibrina, sino solamente grumos. También luego de 60 min de incubación sólo se observaron zonas con grumos de fibrina, siendo la densidad de éstos menor al utilizarse la mayor concentración de veneno. En conclusión, la acción fibrinogenolítica ejercida por el veneno de P. patagoniensis influye en las características estructurales de la red de fibrina. Además, podemos inferir que existen en plasma algún/os componente/s que podrían interferir con la acción de proteínas del veneno con actividad sobre el sistema de la coagulación, así como ya se ha demostrado con otros venenos de serpientes. De este modo, este estudio contribuye al entendimiento de los cambios fisiopatológicos y morfológicos inducidos por el veneno de serpientes opistoglifas, en especial por el de P. patagoniensis que es una especie frecuente de ser hallada en áreas abiertas de la región nordeste de Argentina.

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