Identificación molecular de hongos filamentosos productores de enzimas fibrinolíticas aislados de Las Yungas (Tucumán - Argentina)

ROVATI JI; PAJOT HF; DELGADO OD; FIGUEROA LIC; FARIÑA JI

Mar del Plata, Argentina

Congreso; VI CLAM 2008; 2008

Asociacion latinoamericana de micologia

  La región de Las Yungas Andinas es una selva húmeda que se encuentra en sectores montañosos cercanos a la cadena de Los Andes. Se extiende desde Venezuela, Ecuador, Perú, Bolivia y llega al noroeste de la Argentina, abarcando la parte oeste de las provincias de Salta, Jujuy, Tucumán y Catamarca (Grau & Brown, 2000). Se trata de un ecosistema escasamente estudiado en su diversidad microbiológica y hallazgos e investigaciones de nuestro grupo de trabajo indican un gran potencial como fuente de aislamiento de microorganismos con distintas actividades enzimáticas de interés biotecnológico. El ciclo fibrinolítico es un importante sistema fisiológico destinado a  limitar la formación de exceso de fibrina en los vasos sanguíneos  (Fig. 1). En la trombosis clínica, es posible activar el mecanismo lítico en forma exógena y, de tal manera, digerir grandes cantidades de fibrina in vivo. La administración terapéutica de enzimas fibrinolíticas como la Urokinasa (UK) o la Estreptokinasa (SK) resulta efectiva. Sin embargo su obtención es costosa y/o el producto final provoca efectos colaterales no deseados. Previamente, se realizó el screening correspondiente para determinar los aislamientos productores de enzimas con actividad fibrinolítica. De 219 aislamientos fúngicos testeados, sólo tres de ellos fueron capaces de producir enzimas fibrinolíticas. En comparación a las técnicas convencionales de identificación de aislamientos fúngicos, que ocasionalmente pueden estar influenciadas por las condiciones de cultivo, consumen más tiempo y requieren de amplia experiencia en el observador, las técnicas moleculares, una vez estandarizadas y optimizadas, son independientes del cultivo y pueden ejecutarse en forma rutinaria combinando rapidez y precisión en la identificación de microorganismos. Los genes ribosomales presentan secuencias altamente conservadas. Actualmente se sabe que están compuestos por una mezcla de regiones conservadas y divergentes. Estas últimas son llamadas “regiones divergentes -D” y tienen una orientación que va de 5’ a 3’ del ARNr maduro (Sonnenberg, 2007). La secuenciación de estas regiones, por ejemplo el dominio D1/D2 del gen 28S, permite un reconocimiento intraespecífico entre distintas especies de hongos y levaduras.