El hinchamiento hipotónico promueve el aumento de Óxido Nítrico en Miocitos Cardíacos de Rata: impacto sobre el Efecto Inotrópico Negativo inducido por hinchamiento

MALENA MORELL, MARTIN VILA PETROFF, LUIS GONANO, BURGOS JUAN IGNACIO

Congreso; XXXIV Reunión Científica Anual del Consejo Argentino de Hipertensión Arterial; 2013

Sociedad Argentina de Cardiología

Los cardiomiocitos sufren hinchamiento osmótico en diversas situaciones patológicas. En particular, éste contribuye a los efectos deletéreos de la isquemia y reperfusión al inducir un efecto inotrópico negativo (EIN). Previamente hemos demostrado que el estiramiento axial de los miocitos promueve la liberación de oxido nítrico (NO). Sin embargo, si el hinchamiento osmótico también promueve liberación de NO y si éste tiene algún impacto sobre el EIN inducido por hinchamiento osmótico no ha sido aún examinado. En miocitos cardíacos de ratas wistar, incubados con el sensor fluorescente de NO, DAF-FM, observamos que, bajar la osmolaridad de la solución de perfusión desde 300 mOsm a 217 mOsm aumenta el volumen celular (15±1%), reduce la amplitud de contracción (16±5% a los 15 minutos del shock osmótico) y aumenta significativamente la señal del DAF-FM (17±3%). Cuando la solución hipotónica se administró en presencia de 2.5 mM del inhibidor de la NO sintetasa, L-Name, las células se hincharon normalmente pero no aumentó la señal de DAF-FM (2±2%). Por otra parte, el EIN inducido por hinchamiento se encontró exacerbado en presencia de L-Name (44±7%). Resultados similares se obtuvieron con nitroguanidina, inhibidor de NOS1 y con rianodina más ácido ciclopiazónico, usado para inhibir la función del retículo sarcoplasmático e inactivar la NOS1. Adicionalmente, usando el inhibidor de la polimerización de los microtúbulos (colchicina 10 µM), evaluamos la participación del citoesqueleto como un mecanotransductor necesario para la liberación de NO inducida por hinchamiento y utilizando 1 µM de ODQ (inhibidor la guanilato ciclasa (GC)) evaluamos la participación de la vía GMPc/PKG en los efectos inotrópicos observados. La presencia de colchicina previno el aumento de la señal de DAF-FM inducida por hinchamiento (4±3%), indicando que la integridad del citoesqueleto es necesaria para la liberación de NO y la presencia de ODQ, de modo similar a lo observado en presencia de L-NAME y nitroguanidina, exacerbó el EIN inducido por hinchamiento osmótico. Tomados en conjunto, los resultados demuestran un nuevo mecanismo para la liberación de NO en miocitos cardíacos sometidos a stress hipotónico. Este mecanismo involucraría al citoesqueleto, que censaría el estiramiento de la membrana y los traduciría en activación de la NOS1 que, a su vez conduciría al aumento de NO. La liberación de NO, a través de un mecanismo GMPC-dependiente, podría ser relevante en el contexto de I/R donde podría cumplir un rol cardioprotector al reducir el EIN inducido por hinchamiento osmótico.