EL FACTOR ESTIMULANTE DE COLONIAS DE GRANULOCITOS (G-CSF) PROMUEVE LA MIGRACIÓN DE UNA LÍNEA DE CÉLULAS TROFOBLÁSTICAS HUMANAS DE PRIMER TRIMESTRE

VERÓNICA A. FURMENTO; MADHIVANAN K.; AGUILAR CLAUDIO; JULIETA MARINO; LEONOR P. ROGUIN

Mar del Plata

Congreso; Reunión Anual de SAIC, SAFIS y SAFE; 2013

SAIC, SAFIS y SAFE

EL FACTOR ESTIMULANTE DE COLONIAS DE GRANULOCITOS (G-CSF) PROMUEVE LA MIGRACIÓN DE UNA LÍNEA DE CÉLULAS TROFOBLÁSTICAS HUMANAS DE PRIMER TRIMESTREFurmento V.1; Madhivanan K.2; Aguilar C.2; Marino J.1; Roguin L.1Instituto de Química y Fisicoquímica Biológicas (IQUIFIB)-CONICET, Facultad de Farmacia y Bioquímica, Universidad de Buenos Aires1; University of Purdue, USA2.Previamente determinamos la presencia del receptor para el factor estimulante de colonias de granulocitos (G-CSF) en la línea de células trofoblásticas Swan 71, derivada de placenta humana de primer trimestre. Demostramos que el G-CSF induce un aumento de la actividad proteolítica de la metaloproteínasa-2 y de la secreción del factor de crecimiento del endotelio vascular, a través de la activación de las vías MAPK Erk1/2, PI3K/Akt y del factor nuclear kB (NFkB). Con el fin de estudiar el rol biológico del G-CSF en la migración celular, evaluamos las características morfológicas del citoesqueleto de actina mediante ensayos de inmunofluorescencia con rodamina-faloidina. Encontramos un incremento de aproximadamente un 50% en el número de células que presentan fenotipo migratorio (presencia de lamelipodio y cola) luego de 9 horas de incubación con 100 ng/ml de G-CSF (n=4, p<0,05). Mediante ensayos de migración en cámaras Transwell demostramos que el G-CSF indujo un aumento significativo del número de células que migran luego de 9 horas de incubación (valores de las medianas: 4,1 para el control versus 21,4 para GCSF; n=10, p<0.02). Asimismo, por ?ensayos de herida? (wound healing assay) comprobamos que el G-CSF produjo un incremento del 10% (n=3, p<0.05) en el cierre de la herida de células tratadas con respecto al control (células incubadas en ausencia de GCSF). También demostramos que el G-CSF activó la MAPK p38, y que esta vía, junto con la cascada de MAPK Erk1/2, estarían mediando la migración celular. En su conjunto, los resultados obtenidos revelaron que el G-CSF constituye un estímulo suficiente para inducir la migración de las células trofoblásticas Swan 71, y sugieren que entre las MAPK, Erk1/2 y p38 participan en esta respuesta biológica.