Aislamiento e identificación de microalgas nativas con potencial aplicación biotecnológica

MIÑO, ML; KOLMAN, MA; ZAPATA, PD

Posadas

Jornada; 1ras Jornadas Institucionales INBIOMIS: 10 años construyendo biotecnología; 2022

Instituto de Biotecnologia de Misiones

Las microalgas son un conjunto de microorganismos fotosintéticos oxigénicos quehabitan en una amplia variedad de ambientes tanto acuáticos como terrestres yque utilizan CO2 para producir biomasa, generando O2. En los últimos años, haaumentado el interés en el uso de microalgas para la explotación biotecnológica,siendo una de las principales ventajas los bajos requerimientos nutricionales para sucultivo. Muchas especies de microalgas son capaces de producir diferentes tipos debiocompuestos como antioxidantes, carotenoides, polímeros enzimáticos, lípidos,colorantes naturales, ácidos grasos poliinsaturados, péptidos, toxinas y esteroles,que se utilizan en varios productos industriales. Dada su versatilidad metabólicatienen un gran potencial de aplicación en diversas aplicaciones como la producciónde biodiesel, la obtención de productos destinados a la industria cosmética yfarmacéutica, el uso como suplementos alimentarios y, en términos ambientales,son útiles para la biorremediación de aguas residuales. El objetivo de este trabajofue colectar, aislar e identificar cepas de microalgas nativas de diversas localidadesde Misiones y Corrientes para el posterior estudio de compuestos con potencialaplicación biotecnológica. Durante los años 2019-2021, se obtuvieron muestras dedistintos ambientes, tanto acuáticos como terrestres, de las localidades de Posadas,Garupá, San Ignacio, Santo Pipó, Comandante Andresito en la provincia de Misionesy de la localidad de Ituzaingó, Corrientes. Las muestras obtenidas fueron cultivadasen medio BG11 y posteriormente se realizó el aislamiento de las microalgas pordilución de estría en medio BG11 sólido. Las colonias aisladas a partir de estasplacas fueron analizadas por microscopía óptica para verificar la ausencia de másde una especie. Fueron obtenidos un total de 20 cultivos monoalgales a los cualesse le realizó la extracción de ADN genómico, para la posterior amplificación por PCRutilizando los cebadores para la región ribosomal comprendida entre ITS1-5.8S-ITS2.Los fragmentos amplificados fueron enviados a secuenciar a un servicio externo(Macrogen, Korea). Posteriormente, luego de verificar la calidad de las secuencias yrealizar la edición para obtener los fragmentos consenso, se realizó una búsquedade secuencias utilizando la herramienta BLAST de la página del NCBI y seseleccionaron las 10 secuencias con mayor identidad para cada consenso,seguidamente se realizó el alineamiento de múltiples secuencias utilizando elpaquete ClustalW del software MEGA, utilizando la herramienta Block Mapping and61Gathering of Entropy se seleccionaron las regiones filogenéticas informativas.Finalmente, se determinó el árbol óptimo de acuerdo a los datos del alineamientoutilizando el programa MEGA. Se identificaron molecularmente un total de 16aislamientos de los géneros Eustigmatos, Graesiella, Chlamydomonas, Coelastrella,Desmodesmus, Chlorococcum, Sphaeropleales, Chlamydopodium Y Coelastrum. Apartir de estos cultivos monoalgales, se calculó la tasa específica de crecimientopudiéndose identificar 12 cepas de crecimiento rápido, una de las principalescaracterísticas de relevancia para aplicaciones biotecnológicas y 4 de crecimientointermedio. Este trabajo nos permitió establecer el primer banco de microalgasnativas de la provincia de Misiones que resulta de vital relevancia para iniciar la bioprospección de productos de interés biotecnológico.