INVESTIGADORES
IBAÑEZ Lorena Itati
congresos y reuniones científicas
Título:
Comparación de sistemas de genética reversa aplicables a la generación de virus de influenza a de perdiz
Autor/es:
PAREDES ROJAS YESICA; CALDEVILLA CECILIA; MATIELLO ROSANA ; MATTION NORA ; IBAÑEZ LORENA ITATÍ
Lugar:
Ciudad Autónoma de Buenos Aires
Reunión:
Jornada; Jornadas de Veterinaria; 2013
Resumen:
COMPARACIÓN DE SISTEMA DE GENÉTICA REVERSA APLICABLES A LA GENERACIÓN DE VIRUS DE INFLUENZA A DE PERDIZ PAREDES ROJAS Y., CALDEVILLA C., MATTION N., IBAÑEZ L.I. ICT-César Milstein CONICET Introducción: la creación de herramientas moleculares para el estudio del virus de la gripe ha permitido un gran avance de la genética molecular aplicada a influenza en los últimos tiempos. La investigación básica y la producción de vacunas se han beneficiado en gran medida por el advenimiento de la genética reversa basada en plásmidos que permite la creación de virus de influenza desde copias de DNA clonado desde RNAs genómicos, el sistema de 8 plásmidos en el más utilizado en la actualidad. Existen dos sistemas desarrollados por diferentes laboratorios, que tiene estrategias de clonado diferentes, se conocen como sistemas de Stech y Hoffman. En el año 2009 se aisló un virus de influenza H1N1 que afectó a perdices en diferentes criaderos de Buenos Aires. A pesar de que las características moleculares de este virus, el cual ha sido secuenciado, son para varios genes novedosas y únicas, el mismo no ha sido estudiado en detalle.  Objetivo: analizar las ventajas y desventajas de cada uno de los sistemas de genética reversa que utilizan 8 plásmidos para determinar cuál de ellos es más adecuado para generar virus de influenza H1N1 aislados de perdices en Argentina. Materiales y Métodos: los dos sistemas se compararon teniendo en cuenta el uso de los mismos en publicaciones relacionadas con el tema. Se le dio gran importancia a las dificultades que presentaban cuando debían ser utilizados para clonar las polimerasas PB1 Y PB2, que son los genes que presentan mayores problemas al momento de obtenerlos de manera individual. Además se analizó la disponibilidad de los reactivos necesarios para cada caso. Resultados: se decidió utilizar el sistema de Stech ya que es más utilizado en la actualidad. Presenta las ventajas de que el clonado de genes de gran tamaño ha sido mejorado mediante la introducción en el protocolo de un sistema de PCR que utiliza magaprimers, que aumenta notablemente la probabilidad de clonar los genes de las polimerasas. Por otro lado, los reactivos necesarios son menores y los pasos del protocolo se han disminuido. Conclusiones: a través de un Acuerdo de Transferencia de Materiales (siglas en inglés MTA) se ha obtenido el sistema de 8 plásmidos desarrollado por Stech y se ha empezado a clonar los genes del virus de Influenza A de perdiz utilizando este sistema.