INVESTIGADORES
MAMMARELLA Enrique Jose
congresos y reuniones científicas
Título:
Purificación y caracterización de una L-arabinosa (galactosa) isomerasa de Lactococcus lactis
Autor/es:
TORRES, PEDRO; MANZO, RICARDO; RUBIOLO, AMELIA C; BATISTA-VIERA, FRANCISCO; MAMMARELLA, ENRIQUE
Lugar:
Montevideo
Reunión:
Encuentro; IV Encuentro Regional de Biocatálisis y Biotransformaciones; 2010
Institución organizadora:
Facultad de Química de la Universidad de la República
Resumen:
Se estudiaron dos protocolos de purificación para purificar un extracto de la enzima. En el primero, se efectuó una precipitación con sulfato de amonio al 80 por ciento de saturación, seguida de intercambio iónico secuencial en DEAE-Sepharose y QAE-Sephadex, obteniéndose dos fracciones activas. Este proceso de intercambio permitió incrementar 30 y 40 veces la actividad específica, respectivamente. En el segundo se implementaron dos pasos, una precipitación con sulfato de amonio seguida de cromatografía de afinidad empleando un bioadsorbente basado en la inmovilización de L-arabitol (inhibidor competitivo de esta enzima) en agarosa. Como resultado de esta segunda estrategia de purificación se obtuvo un incremento de casi 790 veces en la actividad específica.