Efeito da modificação química em matriz híbrida quitosana-copolímeros sobre a estabilidade térmica da lipase microbiana imobilizada por ligação covalente multipontual

MENDES, ADRIANO; ADRIANO, WELLINGTON; MAMMARELLA, ENRIQUE; CASTRO, HEIZIR; GIORDANO, RAQUEL

Caxias do Sul, RS, Brasil

Congreso; VII Seminário Brasileiro de Tecnologia Enzimática; 2006

Universidade de Caxia do Sul

Enzimas podem sofrer inativação com perda progressiva da sua atividade catalítica. A imobilização pode promover um aumento na estabilidade do catalisador e possibilitar sua posterior reutilização. Com esse propósito, várias estratégias para a imobilização de enzimas têm sido estudadas, como por exemplo, a imobilização por ligação covalente multipontual. Diversas enzimas, inclusive lipases, vêm sendo imobilizadas por esta técnica para a produção de biocatalisadores com elevada estabilidade térmica devido à formação de ligações covalentes entre a enzima e o suporte. O objetivo deste trabalho consistiu na obtenção de sistemas imobilizados estáveis termicamente empregando matriz híbrida constituída de quitosana e diferentes copolímeros, como carragenina, gelatina ou alginato. Lipase de Aspergillus oryzae adquirida da Novozymes foi imobilizada multipontualmente em quitosana-copolímeros e quitosana controle (sem a adição de copolímero). As matrizes híbridas foram modificadas quimicamente com ácido picril-sulfônico visando aumentar a hidrofobicidade do suporte, possibilitando um microambiente mais favorável ao processo de imobilização da lípase. Como agente de ativação do suporte foram testados os compostos glicidol, epicloridrina e glutaraldeído. O procedimento de imobilização foi realizado em tampão bicarbonato 100 mM (pH 10,05) a 25°C para um carregamento de 5 mg de proteína/g de gel. A atividade lipolítica foi determinada pela hidrólise do azeite de oliva emulsificado (25% m/m) em pH 8,0 a 37°C. Os resultados obtidos mostraram que a ativação empregando glicidol forneceu os derivados imobilizados mais estáveis termicamente.