INVESTIGADORES
FLORES Marina Judith
congresos y reuniones científicas
Título:
ESTUDIO DE LA DESINFECCIÓN DE AGUA CON RADIACION UV-C UTILIZANDO TECNICAS DE PCR
Autor/es:
CRISTIANI MARIANA; ROMERO GABRIELA; FLORES MARINA; TEDESCHI FABIAN; BRANDI RODOLFO; ZALAZAR FABIAN; LABAS MARISOL
Lugar:
Santa Fe
Reunión:
Congreso; Argentina y Ambiente 2017; 2017
Resumen:
El acceso al agua potable y a medios adecuados de saneamiento sigue siendo uno de losprincipales problemas de la humanidad1. La radiación UV es una técnica alternativa dedesinfección del agua que carece de los efectos secundarios que produce la cloraciónconvencional. La eficacia de la radiación UV-C, para la inactivación de microorganismos esdebido a que afecta directamente el material genético ADN y ARN2. Para el análisis del ADN seutiliza la técnica de Reacción en Cadena de la Polimerasa (PCR). En el presente trabajo seevaluó la utilidad de una variante de la PCR clásica conocida como ERIC-PCR, que generahuellas dactiloscópicas de ADN3, para analizar la inactivación de Escherichia coli durante ladesinfección con radiación UV-C.Los ensayos experimentales se realizaron en un reactor anular batch con una capacidad de2000 ml, mezcla perfecta con agitación mecánica y una lámpara UV germicida (Philips TUV15W) dispuesta en el eje axial. Las corridas consistieron en colocar un cultivo de E. coli ATCC8739 de una concentración de 1011 UFC/cm3 dentro del reactor, las cuales fueron irradiadascon una lámpara UV-C durante 60 segundos. En el transcurso de ese tiempo se tomaronmuestras para realizar diluciones seriadas y asíobtener el recuento de colonias viables en agarEMB. También se analizó el ADN de losmicroorganismos tratados mediante la técnicade ERIC-PCR, revelando los resultadosmediante una electroforesis en gel de agarosa.La imagen digital del gel fue analizada con unsoftware especializado.Observando los resultados del desarrollo delas colonias se logró un descenso de más de 4unidades logarítmicas (99.99% de inactivación)a los 12 segundos de exposición a la radiación.Simultáneamente, pudo comprobarse que amedida que transcurre la reacción deinactivación, en el gel, las bandas de mayor peso molecular se van atenuando hastadesaparecer. Este resultado fue apoyado por el análisis densitométrico de las bandas. Por lotanto existiría una correlación directa entre los resultados de la densitometría y el nivel de dañorecibido por las bacterias.Como conclusión, en primer lugar, queda demostrado que el método de desinfección conradiación UV-C es altamente eficiente contra E. coli en agua. Además la técnica utilizada paraevidenciar el daño producido al ADN por radiación UV es apropiado, ya que se puede observarla desaparición paulatina de las bandas en el gel, asociadas al proceso de inactivación. Losresultados obtenidos son prometedores para poder desarrollar una expresión cinética deinactivación a partir de la determinación del daño producido, utilizando técnicas de PCR.