OPTIMIZACIÓN DE EXTRACCIÓN DE PROTEASAS A PARTIR DE UN EFLUENTE DE ALTO IMPACTO AMBIENTAL

FOLMER, MARIANA; LOVATO, MARÍA EUGENIA; MANZO, RICARDO MARTÍN

Santa Fe

Encuentro; 26º Encuentro de Jóvenes Investigadores de la UNL; 2023

Los lixiviados de relleno sanitario son efluentes acuosos originados tanto en la fermentación como en la infiltración de agua de los residuos dispuestos en vertederos urbanos. Usualmente se encuentran altamente contaminados con hidrocarburos halogenados, compuestos orgánicos, sales inorgánicas, gases tóxicos, sales inorgánicas y una gran cantidad de metales pesados que conllevan una gran amenaza a la salud pública y ambiental. (Babaei 2021). Particularmente, los lixiviados del relleno sanitario de Santa Fe poseen un bajo pH, alta salinidad, alta conductividad y alta concentración de sustancias húmicas y metales pesados (resultados propios no publicados).Cuando matrices complejas como los suelos se contaminan, son perturbadas de forma irreversible debido a la adaptación de la microbiota a la presencia de esos compuestos recalcitrantes, evidente por la reducción de ciertos géneros de microorganismos y la adaptación de otros asociados con la tolerancia ambiental extrema y a la posibilidad de neutralizar, inhibir o metabolizar estos contaminantes. Las enzimas microbianas juegan un rol preponderante en el mantenimiento o retorno a la salud de suelos contaminados, por lo que caracterizar a las enzimas y sus fuentes se vuelve un rol fundamental de la ciencia en la restauración ambiental (Kumar, Sharma 2019). Debido a la gran dificultad en el aislamiento y cultivo de ambientes extremos, se vuelve esencial desarrollar herramientas como el análisis enzimático y la metaproteómica para su diagnóstico y tratamiento.Entre las enzimas más importantes para la degradación de contaminantes se encuentran las proteasas, que son un diverso grupo de hidrolasas que rompen los enlaces peptídicos de las proteínas para producir péptidos y/o aminoácidos libres y juegan un papel importante en la fijación de nitrógeno en el suelo (Greenfield 2021).Son principalmente extracelulares y pueden permanecer activas durante largos períodos de tiempo por estar protegidas contra la degradación al interactuar con otras partículas reactivas o a través de su atrapamiento en moléculas húmicas. Por esta razón, se elige en el presente trabajo comenzar el desarrollo de perfiles enzimáticos de lodos del relleno sanitario con la medición de la actividad proteasa. Debido a la falta de estudios relacionados con la extracción de proteínas y la medición de actividades enzimáticas en lixiviados, validamos varios métodos de extracción de proteínas previamente empleados en diferentes estudios de suelo y los adaptamos para muestras de lixiviados.OBJETIVOS Obtener extractos proteicos que conserven su actividad enzimática a partir de un efluente complejo. Desarrollar técnicas analíticas que permitan identificar y cuantificar actividades enzimáticas de interés en los extractos para aplicaciones en biorremediación.