Identificación por PCR y secuenciación de Parvovirus Canino del tipo 2c (PVC2c) en animales vacunados, con sintomatología clínica de PVC en la República Argentina.

GALLO CALDERON, MARINA; BUCAFUSCO, DANILO; FOGEL, FERNANDO; MATTION, NORA; LA TORRE, JOSE

Ciudad de Buenos Aires

Congreso; IX CONGRESO ARGENTINO DE VIROLOGIA; 2008

Sociedad Argentina de Virologia

ANTECEDENTES: el PVC pertenece a la Familia Parvoviridae, Género Parvovirus. Es un virus no envuelto, con un genoma a ADN de cadena simple, altamente contagioso, que provoca miocarditis y gastroenteritis hemorrágicas severas en cachorros, mostrando altas tasas de morbilidad y mortalidad. Desde su aislamiento, en 1978, el PVC ha sufrido cambios antigénicos que han sido identificados con anticuerpos monoclonales. Las variantes antigénicas, PVC2a y PVC2b, reemplazaron secuencialmente a la cepa original PVC2 y se encuentran en distintas proporciones en las poblaciones caninas de todo el mundo. Recientemente, se ha descrito inicialmente en Italia y luego en Vietnam, España y EEUU la aparición de una nueva cepa denominada PVC2c que presenta en la posición 426 de la proteína de la cápside (VP2),  un resíduo Glu en reemplazo de un Asp presente en las cepas PVC2b ó una Asn en las cepas PVC2a.   OBJETIVO: caracterizar mediante las técnicas de PCR y secuenciación, PVC a partir de muestras de animales con sintomatología clínica de PVC. MATERIALES Y MÉTODOS: las muestras son en todos los casos, hisopados rectales. Luego del tratamiento de los mismos con proteinasa K en un buffer de lisis, se extrajo el ADN con fenol-cloroformo. Para cada muestra analizada, la tipificación se realizó con 3 reacciones de PCR conteniendo 3 sets de primers diferentes: un par que reconoce a la cepa CPV2 (P2), otro par que reconoce a las variantes CPV2a y CPV2b (Pab) y otro par que reconoce a la cepa CPV2b (Pb). La región amplificada del genoma, corresponde a 681/681 y 427 pares de bases respectivamente del gen de la VP2 del genoma viral. Los fragmentos de ADN obtenidos con el set de primer Pb, fueron clonados en pGEM®-T Easy Vector y secuenciados. Las secuencias obtenidas, se analizaron utilizando el programa Clustal W. RESULTADOS: de un total de 20 muestras analizadas entre los años 2007 y 2008, 6 muestras fueron negativas, 2 fueron tipificadas como CPV2a, una como CPV2b y 11 como CPV2c. En ninguno de los casos analizados se detectó la cepa PVC2. CONCLUSIONES: se detectó y caracterizó por primera vez en Argentina, una variante antigénica importante de PVC que provoca diarreas severas en cachorros con esquema de vacunación completo.