PRODUCCIÓN DE LA NUCLEOPROTEÍNA DEL VIRUS DISTEMPER CANINO EN PLANTAS TRANSPLASTÓMICAS DE TABACO: PURIFICACIÓN Y ANÁLISIS DE SU VALOR INMUNOGÉNICO EN EL MODELO MURINO

LAGUIA BECHER, MELINA; CARINA ROMANUTTI; GALLO CALDERON, MARINA; ANDREA TRENTINI; ALVAREZ, ALEJANDRA; JON VERAMENDI; PATRICIA MARCONI

Simposio; X Encuentro Latinoamericano y del Caribe de Biotecnología Agropecuaria y XII Simposio REDBIO Argentina; 2019

El uso de las plantas como biorreactores para la expresión de antígenos es una alternativaatractiva para la producción de vacunas a subunidades. En particular, las plantas transplastómicascontienen un alto número de copias del transgén (>10000/célula). Además, como laintegración del mismo es sitio específica se evitan los efectos de posición y silenciamiento.Estás características, en combinación con la compartimentalización de la proteína en los cloroplastos,permite obtener altos niveles de acumulación de la proteína recombinante. El VirusDistemper Canino (VDC) provoca moquillo, una enfermedad multisistémica altamente contagiosapara perros y otras familias de animales. Aunque la inmunización con cepas atenuadasdel VDC ha demostrado ser eficaz, en los últimos años se ha registrado un aumento en elnúmero de animales vacunados que contraen esta enfermedad. Por este motivo, resulta necesarioel desarrollo de nuevas vacunas que contengan inmunógenos actualizados. Con elobjeto de evaluar una vacuna vegetal contra el moquillo, se obtuvieron plantas transplastómicasde tabaco que producen la nucleoproteína (NP) de una cepa Argentina del VDC. La proteínaNP fue purificada de las hojas de las plantas transplastómicas en condicionesdesnaturalizantes obteniéndose un rendimiento de 0,07 mg/g de peso fresco. La inmunización de ratones por vía subcutánea (sc) con la proteína NP produjo una respuesta específica de anticuerpos IgG anti-NP, con títulos significativamente mayores al grupo control. Asimismo, se detectaron niveles significativos de IgG1 e IgG2a en los ratones inmunizados con NP. Los resultados obtenidos muestran que la proteína NP producida en plantas es capaz de inducir una respuesta inmune humoral específica en el modelo murino.