INVESTIGADORES
GALLO CALDERON marina beatriz
congresos y reuniones científicas
Título:
CLONADO Y SECUENCIAMIENTO DEL GEN COMPLETO DE LA NUCLEOPROTEINA (NP) DE CEPAS VACUNALES YSALVAJES ARGENTINAS DEL VIRUS DISTEMPER CANINO
Autor/es:
GALLO CALDERON, MARINA; CARINA ROMANUTTI; LETICIA KELLER; MATTION, NORA; LA TORRE, JOSE
Lugar:
Buenos Aires
Reunión:
Congreso; XV CONGRESO NACIONAL DE LA ASOCIACIÓN DE VETERINARIOS ESPECIALIZADOS EN ANIMALES DE COMPAÑÍA DE ARGENTINA (AVEACA); 2015
Institución organizadora:
AVEACA
Resumen:
Introducción: El Virus Distemper Canino (VDC) es un miembro del género Morbillivirus, familia Paramyxoviridae; es altamente contagioso y afecta a cánidos domésticos y salvajes. Las vacunas a virus vivo modificadas desarrolladas en los ?60 lograron controlar la enfermedad, pero recientemente se han registrado a nivel mundial y en nuestro país, un aumento de casos de VDC tanto en animales vacunados como en no vacunados. En el ICT Milstein se realiza desde hace mas de 10 años, el diagnóstico molecular del VDC, entre otros patógenos caninos, el cual consiste en una amplificación por RT-PCR de un fragmento del gen de la Nucleoproteína (NP). Es por ello que contamos en nuestro laboratorio, con el material necesario para el estudio de los genes completos de diferentes cepas locales de VDC.El objetivo del trabajo fue por un lado, obtener clonados los genes completos de la NP de cepas locales de VDC, y por otro, estudiar la variabilidad genética en las secuencias obtenidas, con respecto a cepas vacunales. Materiales y Métodos: en los últimos 3 años, hemos recibido en nuestro laboratorio, un total de 112 muestras de sangre coagulada, para el diagnóstico molecular de VDC. Luego de la extracción del ARN con Trizol®, pudimos amplificar por RT-PCR un fragmento de 287 pares de bases (pb) correspondiente al gen de la NP de VDC, en 28 de ellas. Dos de los ARNs obtenidos de muestras de sangre de animales con diagnóstico positivo para VDC, fueron sometidos a amplificación del gen completo de la NP, el cual también fue amplificado en una vacuna comercial. Los Resultados: se alinearon las secuencias aminoacídicas correspondientes al gen completo de la proteína NP de las cepas argentinas de VDC junto con la cepa vacunal Onderstepoort y otras cepas salvajes internacionales. Se observó un alto grado de conservación de más del 97% a nivel aminoacidico entre las cepas salvajes y con respecto a la cepa vacunal Onderstepoort a lo largo de los 523 aminoacidos. Discusión: este gen, al ser altamente conservado, permite su eventual utilización como inmunógeno que pueda generar una respuesta de anticuerpos que protejan contra los diferentes genotipos de VDC.Conclusiones: En este trabajo, se obtuvieron por primera vez, secuencias completas de los genes NP, de cepas salvajes presentes en nuestro país. Además, el análisis molecular, permitió confirmar y extender los resultados obtenidos en otros países que muestran el alto grado de conservación del gen de la NP, haciéndolo una región genómica de gran relevancia para el diagnóstico molecular.