ANÁLISIS MOLECULAR DEL GEN DE LA HEMAGLUTININA EN CEPAS ARGENTINAS DE VIRUS DISTEMPER CANINO

GALLO CALDERON, MARINA; LETICIA KELLER; NICOLAS SARUTE; YANINA PANZERA; MATTION, NORA; RUBEN PEREZ; JOSE LA TORRE

Congreso; X Congreso Argentino de Virología, III Simposio de Virología Clínica y I Simposio de Virología Veterinaria; 2011

Análisis molecular del gen de la Hemaglutinina en cepas Argentinas de Virus Distemper Canino El virus del Distemper Canino (VDC), miembro del Género Morbillivirus en la Familia Paramyxoviridae, es el agente causal de una enfermedad sistémica, altamente contagiosa y por lo general mortal, en perros y otros carnívoros salvajes. La enfermedad se previene con vacunación; generalmente con vacunas a virus vivo modificado (VVM) que fueron desarrolladas en la década del ´60. Recientemente, se han registrado a nivel mundial y en Argentina, numerosos casos de perros enfermos en poblaciones vacunadas. Estos casos, estarían relacionados con modificaciones genéticas y antigénicas por evolución y circulación de los virus de campo. Se ha demostrado que el gen de la Hemaglutinina (H) es la región del genoma viral que presenta mayor variabilidad, por lo tanto, el objetivo de este estudio es el análisis genético y molecular de este gen. El objetivo de este trabajo fue evaluar la variabilidad genética en el gen completo de la H de 4 cepas locales de CDV con respecto a las cepas vacunales y a cepas internacionales. Se recuperó el ARN viral con Trizol, a partir de muestras de sangre de animales con sintomatología clínica compatible con CDV. Las muestras, se diagnosticaron como positivas para CDV mediante la amplificación por RT-PCR, de un fragmento de 287 pares de bases (pb) de la nucleoproteína (NP) viral (región altamente conservada del genoma). También, se amplificaron por RT-PCR los genes completos de la H los cuales fueron secuenciados. Las secuencias obtenidas fueron analizadas con el programa Clustal W. Las comparación de las secuencias del gen completo de la H obtenidas de cepas locales, mostró un 89-90% de identidad con respecto a la cepa vacunal Onderstepoort. Esta variabilidad del 10% estaría relacionada con la falta de reconocimiento entre los anticuerpos producidos contra la cepa vacunal y las cepas salvajes. Este mismo porcentaje de identidad, se observó entre las cepas salvajes de otras regiones del mundo como Alemania, Japón e Italia y la cepa Onderstepoort. El análisis filogenético, reveló la presencia de 2 genotipos en nuestro país; uno, conformado por cepas Uruguayas y la cepa Argentina ”PaArg90” y el otro, conformado por las cepas (”BruArg107”,”CDArg” y ”RamArg”), más relacionado con el genotipo América 2, que incluye cepas pertenecientes a animales de vida silvestre de EEUU. Los resultados obtenidos, confirman y extienden resultados anteriores que muestran diferentes linajes de CDV de acuerdo a la localización geográfica.